SK-N-SH人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
SK-N-SH人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系是研究神經(jīng)母細(xì)胞瘤的標(biāo)gan模型，以神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)雙向分化潛能、豐富神經(jīng)標(biāo)志物表達(dá)及穩(wěn)定惡性表型為核心特征，在腫瘤發(fā)生機(jī)制、細(xì)胞分化調(diào)控及靶向藥物研發(fā)中占據(jù)重要地位，為解析神經(jīng)母細(xì)胞瘤從原始神經(jīng)嵴細(xì)胞惡變到進(jìn)展的全程提供了可靠實(shí)驗(yàn)載體。
來(lái)源與背景：1970 年從 4 歲女性患者骨轉(zhuǎn)移灶分離建立，屬未分化型神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系。相比原發(fā)灶來(lái)源細(xì)胞，其更貼近腫瘤經(jīng)血行轉(zhuǎn)移后的生物學(xué)狀態(tài)，尤其適合研究遠(yuǎn)處播散機(jī)制。作為首ge發(fā)現(xiàn)的雙向分化神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系，長(zhǎng)期傳代后仍保持分化特性，填bu了該類型腫瘤分化研究模型空白，至今仍是國(guó)際神經(jīng)母細(xì)胞瘤分化研究的關(guān)鍵參照。
細(xì)胞特性：形態(tài)呈多形性，含小型圓形未分化神經(jīng)母細(xì)胞及大型多極神經(jīng)元樣細(xì)胞，貼壁生長(zhǎng)并形成神經(jīng)突樣結(jié)構(gòu)，細(xì)胞質(zhì)含神經(jīng)顆粒，核圓、核仁明顯，核質(zhì)比 1:1.2，具典型惡性形態(tài)。核心特征包括：雙向分化潛能，特定條件下可向神經(jīng)元（表達(dá) NSE、MAP2）或神經(jīng)膠質(zhì)（表達(dá) GFAP）分化，佛波酯可誘導(dǎo)膠質(zhì)分化，是分化調(diào)控機(jī)制研究的理想模型；神經(jīng)標(biāo)志物富集，基礎(chǔ)狀態(tài)即高表達(dá) NF、Syn，NF 水平為其他神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系的 1.5-2 倍；增殖與侵襲能力，倍增時(shí)間 48-60 小時(shí)，克隆形成率 55%，裸鼠成瘤率 100%，Transwell 穿透能力是正常神經(jīng)嵴細(xì)胞的 5-7 倍。傳代用常規(guī)消化液處理 2-4 分鐘，比例 1:3-1:5，傳代 50 次仍保分化潛能。
培養(yǎng)條件：采用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養(yǎng)基，添加 1% 非必需氨基酸及抗菌劑，37℃、5% CO?環(huán)境培養(yǎng)。細(xì)胞密度需 30%-70%，過(guò)度匯合使分化比例升高，未分化細(xì)胞減少 15%-20%。對(duì)誘導(dǎo)分化劑敏感，傳代時(shí)用含血清培養(yǎng)基終止消化以保護(hù)膜表面分化相關(guān)受體。凍存液為 10% DMSO 胎牛血清，復(fù)蘇后 24 小時(shí)貼壁率超 85%，活性穩(wěn)定。
檢測(cè)鑒定：無(wú)微生物污染，符合實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。免疫細(xì)胞化學(xué)顯示 NF、Syn 陽(yáng)性，誘導(dǎo)后 NSE 上調(diào)、GFAP 陽(yáng)性，表型典型。核型為亞二倍體，含 1 號(hào)染色體短臂缺失、17 號(hào)染色體三體，與 60% 臨床樣本遺傳學(xué)改變一致。功能驗(yàn)證中，誘導(dǎo)處理后增殖降 30%，神經(jīng)突增長(zhǎng) 2-3 倍，證實(shí)分化潛能與臨床誘導(dǎo)治療反應(yīng)吻合。
應(yīng)用領(lǐng)域：分化機(jī)制研究中，揭示 MYCN 基因擴(kuò)增是未分化狀態(tài)的關(guān)鍵，沉默后細(xì)胞自發(fā)向神經(jīng)元分化，NSE 上調(diào) 2-3 倍，為分化阻滯機(jī)制提供線索。藥物篩選中，用于評(píng)估誘導(dǎo)分化藥物，通過(guò)檢測(cè)分化比例、增殖及凋亡篩選有效藥物，與靶向藥聯(lián)用協(xié)同增效。轉(zhuǎn)移研究中，其高表達(dá) MMP-2、MMP-9 降解神經(jīng)基質(zhì)，靶向抑制可降低侵襲力，為抗轉(zhuǎn)移藥物提供靶點(diǎn)。此外，可研究與神經(jīng)微環(huán)境的互作，其分泌的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子與周?chē)窠?jīng)細(xì)胞因子形成雙向調(diào)節(jié)，為微環(huán)境依賴性研究奠定基礎(chǔ)。
相較 SH-SY5Y 等細(xì)胞系，SK-N-SH 的雙向分化潛能更強(qiáng)，能全面模擬不同分化階段特征。對(duì)其研究可為 “分化誘導(dǎo)治療" 提供依據(jù)，推動(dòng)神經(jīng)母細(xì)胞瘤治療策略優(yōu)化。
以上信息僅供參考，詳細(xì)信息請(qǐng)聯(lián)系我們。
會(huì)員.png)
13
化工儀器網(wǎng)