PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞系
PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞系在神經(jīng)生物學(xué)與腫瘤研究領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，憑借其兼具腎上腺嗜鉻細(xì)胞與神經(jīng)元的雙重特性，成為探究神經(jīng)分化機(jī)制、兒茶酚胺分泌調(diào)控及腫瘤細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的重要實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，為神?jīng)內(nèi)分泌相關(guān)研究提供了可靠的細(xì)胞工具。
細(xì)胞特性與來(lái)源背景：該細(xì)胞系源自大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞瘤組織，經(jīng)原代培養(yǎng)和克隆化建立。未分化狀態(tài)下細(xì)胞呈多角形或上皮樣，胞質(zhì)內(nèi)可見嗜鉻顆粒，細(xì)胞核呈圓形，位于細(xì)胞中央，核仁明顯；經(jīng)誘導(dǎo)后呈現(xiàn)神經(jīng)元樣形態(tài)，長(zhǎng)出細(xì)長(zhǎng)突起，胞體縮小，核質(zhì)比增大。生長(zhǎng)方式為貼壁生長(zhǎng)，部分細(xì)胞輕微懸浮，傳代后 24 小時(shí)貼壁率約 92%。核心參數(shù)表現(xiàn)穩(wěn)定：倍增時(shí)間約 72 小時(shí)，連續(xù)傳代 60 次后仍保持異常染色體核型（染色體數(shù)約 43-45 條）；神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)志物如羥化酶（TH）、多巴胺 β- 羥化酶（DBH）免疫熒光染色呈強(qiáng)陽(yáng)性，細(xì)胞純度達(dá) 94%；無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體及病毒污染，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價(jià)值：在神經(jīng)分化研究中，PC-12 細(xì)胞經(jīng)神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）誘導(dǎo)后，72 小時(shí)內(nèi)神經(jīng)元突起長(zhǎng)度可達(dá)胞體直徑的 5 倍以上，微管相關(guān)蛋白 2（MAP2）表達(dá)量增加 3.8 倍，可模擬神經(jīng)元分化過(guò)程，為解析神經(jīng)突起生長(zhǎng)的分子機(jī)制提供理想模型。兒茶酚胺分泌調(diào)控方面，該細(xì)胞在高鉀溶液刺激下，腎上腺素釋放量增加 2.7 倍，能很好地模擬嗜鉻細(xì)胞的分泌功能，助力交感神經(jīng)調(diào)控機(jī)制的探究。腫瘤研究領(lǐng)域，該細(xì)胞高表達(dá)原癌基因 c-Myc，其 mRNA 水平較正常腎上腺細(xì)胞升高 4.1 倍，經(jīng)相關(guān)藥物處理后凋亡率達(dá) 58%，適用于評(píng)估抗腫瘤藥物的療效及耐藥機(jī)制。此外，將細(xì)胞與施萬(wàn)細(xì)胞共培養(yǎng)，可構(gòu)建體外神經(jīng) - 內(nèi)分泌交互模型，用于研究神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)激素分泌的調(diào)節(jié)作用。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 10% 馬血清和 5% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 1% 抗生素混合液預(yù)防污染，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 3 天更換一次，誘導(dǎo)分化時(shí)加入 50ng/ml NGF，每 2 天更換一次誘導(dǎo)培養(yǎng)基。傳代時(shí)采用含 EDTA 的消化液處理，37℃孵育 5-8 分鐘，待細(xì)胞間隙增大后加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，傳代比例為 1:2-1:3，每 5-7 天傳代一次，維持細(xì)胞融合度在 60%-70% 以保持分化潛能。凍存液配方為基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時(shí)→-80℃過(guò)夜→液氮保存）后，復(fù)蘇細(xì)胞存活率達(dá) 88% 以上，4-5 代內(nèi)可恢復(fù)正常的分化能力。運(yùn)輸采用干冰凍存管或 T-25 培養(yǎng)瓶活細(xì)胞運(yùn)輸，收到細(xì)胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時(shí)，更換培養(yǎng)基后觀察細(xì)胞形態(tài)，確認(rèn)無(wú)異常漂浮物后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞系僅限科研使用，禁止用于臨床診療相關(guān)研究。
PC-12 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞系以其du特的神經(jīng)分化潛能、明確的分泌特性及易于培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)，在神經(jīng)生物學(xué)與腫瘤學(xué)交叉研究中發(fā)揮著不可替代的作用，為推動(dòng)神經(jīng)內(nèi)分泌領(lǐng)域研究的發(fā)展提供了有力支持。
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