NRK-52E大鼠腎細胞系
NRK-52E大鼠腎細胞系作為源自大鼠腎臟近曲小管的上皮細胞模型，因保留近曲小管te有的重吸收功能與代謝活性，在腎臟生理功能解析、腎小管損傷機制及相關(guān)疾病研究中占據(jù)重要地位，是探究腎臟近曲小管功能及疾病的理想實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠腎臟近曲小管組織，經(jīng)原代培養(yǎng)和純化獲得。細胞形態(tài)呈典型上皮樣，多為立方形或多邊形，胞體大小均勻（直徑約 16-20μm），胞質(zhì)豐富且呈嗜酸性，可見大量線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，約 15% 細胞有細小胞質(zhì)突起，細胞核呈圓形，位于細胞中央，核仁清晰。生長方式為貼壁生長，呈單層鋪路石樣排列，接觸抑制明顯，傳代后 24 小時貼壁率達 94%。核心參數(shù)符合正常腎近曲小管細胞特征：倍增時間約 56 小時，連續(xù)傳代 20 次仍保持穩(wěn)定生物學特性；表面標志物表達顯著，γ- 谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）陽性率 95%，細胞角蛋白 18（CK18）陽性率 93%，近曲小管特異性蛋白 megalin 陽性率 91%；具有正常二倍體核型（42 條染色體），無畸變；重吸收功能活躍，葡萄糖轉(zhuǎn)運速率達 32nmol/(h?mg 蛋白)，氨基酸吸收量達 28nmol/(h?10?細胞)；可分泌腎損傷分子 1（KIM-1），基礎(chǔ)分泌量 12ng/mL，損傷狀態(tài)下分泌量顯著增加；無微生物污染，細胞純度 97%，確保實驗結(jié)果可靠。
科研應用價值：在腎小管重吸收機制研究中，NRK-52E 細胞經(jīng)胰島素處理 48 小時后，鈉 - 葡萄糖共轉(zhuǎn)運體 2（SGLT2）表達量增加 3.2 倍，葡萄糖重吸收速率提升 58%，可模擬胰島素對近曲小管糖重吸收的調(diào)控，為解析糖代謝相關(guān)腎臟疾病提供模型。
腎損傷機制研究方面，該細胞經(jīng)shun鉑（5μM）處理 24 小時后，乳酸脫氫酶（LDH）釋放量增加 4.5 倍，活性氧（ROS）水平提升 62%，凋亡率達 40%；而經(jīng)抗氧化劑處理后，細胞存活率提升 52%，氧化應激水平下降 55%，可模擬hua療藥物致腎損傷及保護過程，適用于探究腎損傷修復機制。
腎臟疾病研究領(lǐng)域，該細胞經(jīng)高糖（30mM）處理后，轉(zhuǎn)化生長因子 -β1（TGF-β1）表達量增加 3.8 倍，Ⅰ 型膠原蛋白分泌量提升 60%，α- 平滑肌肌動蛋白（α-SMA）陽性率達 45%，能模擬糖尿病腎病中的腎小管間質(zhì)纖維化過程，為研究代謝性腎病提供實驗基礎(chǔ)。此外，與腎成纖維細胞共培養(yǎng)時，成纖維細胞增殖速率增加 2.3 倍，膠原合成量提升 50%，可用于探究腎小管 - 間質(zhì)相互作用在腎纖維化中的機制。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，添加 1% 非必需氨基酸、1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基每 2 天更換一次，維持細胞代謝活性。傳代時，用 PBS 沖洗 2 次，加入專用細胞解離液，37℃孵育 8-10 分鐘，待細胞間隙增大后輕吹脫落，傳代比例 1:3-1:4，每 4-5 天傳代一次，避免過度傳代影響功能。
凍存液采用培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清混合液，細胞濃度調(diào)至 4×10?個 /ml，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存），復蘇存活率 85% 以上，2-3 代恢復正常生長功能。運輸采用干冰冷凍或培養(yǎng)瓶活細胞運輸，收到后靜置培養(yǎng) 24 小時，換液后觀察細胞形態(tài)，確認無異常漂浮物且排列整齊后進行實驗。該細胞系僅限科研使用，操作時避免頻繁更換培養(yǎng)條件，以防影響代謝功能。
NRK-52E 大鼠腎細胞系以其穩(wěn)定的近曲小管特性、完整的重吸收功能及典型的損傷應答，在腎臟生物學研究與疾病機制探索中作用顯著，為揭示腎臟疾病機制和開發(fā)治療藥物提供可靠細胞模型。
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