NRK大鼠腎細胞系
NRK大鼠腎細胞系作為源自大鼠腎臟皮質的正常腎實質細胞模型，因保留腎臟的物質轉運功能及損傷應答特性，在腎臟生理功能調控、腎損傷修復機制及腎臟疾病病理研究中具有重要價值，成為探究腎臟相關生理與病理過程的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠腎臟皮質的近曲小管區(qū)域，經原代培養(yǎng)和純化獲得。細胞形態(tài)呈上皮樣，多為多邊形或立方形，胞體大小均勻（直徑約 16-20μm），胞質豐富且呈嗜酸性，可見較多的線粒體和內質網，約 12% 細胞可見細小的胞質突起，細胞核呈圓形或橢圓形，位于細胞中央，核仁清晰。生長方式為貼壁生長，呈單層鋪路石樣排列，具有明顯的接觸抑制現象，傳代后 24 小時貼壁率達 93%。核心參數表現出正常腎細胞特征：倍增時間約 60 小時，連續(xù)傳代 20 次后仍保持穩(wěn)定的生物學特性；表面標志物表達du特，細胞角蛋白 18（CK18）陽性率達 95%，腎臟近曲小管標志物 γ- 谷氨酰轉肽酶（GGT）陽性率 92%，上皮細胞黏附分子（EpCAM）陽性率 90%；具有正常的二倍體核型（染色體數 42 條），無染色體畸變；物質轉運功能活躍，葡萄糖轉運速率達 28nmol/(h?mg 蛋白)，氨基酸吸收量達 35nmol/(h?10?細胞)；可分泌腎特異性蛋白，尿調節(jié)素基礎分泌量達 22ng/mL；無微生物污染，細胞純度達 96%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在腎臟物質轉運研究中，NRK 細胞經血管升壓素處理 48 小時后，水通道蛋白 2（AQP2）表達量增加 3.2 倍，水重吸收速率提升 55%，可模擬激素對腎小管水轉運功能的調控過程，為解析腎臟水代謝機制提供理想模型。
在腎損傷修復研究方面，該細胞經腎毒性藥物處理后，乳酸脫氫酶（LDH）釋放量增加 4.2 倍，炎癥因子 IL-6 分泌量提升 58%，細胞凋亡率達 35%；而經腎臟保護因子處理后，細胞存活率提升 45%，增殖活性增加 50%，可模擬化學性腎損傷及修復過程，適用于探究腎損傷修復的分子機制。
腎臟疾病研究領域，該細胞經高尿酸（600μmol/L）處理后，氧化應激水平提升 60%，炎癥因子 TNF-α 分泌量增加 4.5 倍，細胞外基質蛋白表達量提升 38%，能很好地模擬高尿酸血癥引起的腎損傷，為探究痛風性腎病的發(fā)病機制提供實驗基礎。此外，該細胞與腎間質成纖維細胞共培養(yǎng)時，成纖維細胞的 α- 平滑肌肌動蛋白（α-SMA）表達量增加 3 倍，可用于探究腎實質細胞與間質細胞相互作用在腎纖維化中的調控機制。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，添加 1% 非必需氨基酸及 1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 2-3 天更換一次，以維持細胞的正常功能。傳代時，用 PBS 沖洗細胞 2 次，加入專用細胞解離液，37℃孵育 8-10 分鐘，待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落，傳代比例為 1:3-1:4，每 5-6 天傳代一次，避免過度傳代導致功能下降。
凍存液采用培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，細胞濃度調整為 3×10?個 /ml，經程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復蘇存活率達 85% 以上，3-4 代內可恢復正常的生長和轉運功能。運輸采用干冰冷凍運輸或培養(yǎng)瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時，更換培養(yǎng)基后觀察細胞形態(tài)，確認無異常漂浮物且排列整齊后進行實驗。該細胞系僅限科研使用，操作時需避免頻繁更換培養(yǎng)條件，以防影響其物質轉運功能。
NRK 大鼠腎細胞系以其穩(wěn)定的腎臟細胞特性、完整的物質轉運功能及典型的損傷應答能力，在腎臟生物學研究與腎臟疾病機制探索中發(fā)揮著重要作用，為揭示腎臟疾病的發(fā)病機制和開發(fā)腎臟保護藥物提供了可靠的細胞模型。
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