NRK正常大鼠腎細(xì)胞系
NRK正常大鼠腎細(xì)胞系作為保留正常腎臟上皮細(xì)胞生物學(xué)特性的永生化細(xì)胞模型，在腎臟生理功能、腎損傷機(jī)制及藥物腎毒性研究中應(yīng)用廣泛，憑借其穩(wěn)定模擬正常腎小管上皮細(xì)胞功能的特性，成為探究腎臟相關(guān)疾病的重要實(shí)驗(yàn)工具。
細(xì)胞特性與來(lái)源背景：該細(xì)胞系源自大鼠正常腎臟皮質(zhì)組織，經(jīng)原代培養(yǎng)及永生化處理建立。細(xì)胞形態(tài)呈典型上皮樣，多為立方形或多邊形，胞質(zhì)豐富，可見(jiàn)清晰的細(xì)胞邊界，約 12% 細(xì)胞呈現(xiàn)雙核現(xiàn)象，細(xì)胞核呈圓形，核仁明顯，核質(zhì)比適中。生長(zhǎng)方式為緊密貼壁生長(zhǎng)，呈規(guī)則的鋪路石樣排列，具有明顯接觸抑制，傳代后 24 小時(shí)貼壁率達(dá) 95%，顯著高于腫瘤源性腎細(xì)胞系。核心參數(shù)表現(xiàn)穩(wěn)定：倍增時(shí)間約 60 小時(shí)，連續(xù)傳代 50 次后仍保持正常二倍體核型（染色體數(shù) 42 條）；腎小管上皮標(biāo)志物如細(xì)胞角蛋白 18（CK18）、鈉鉀 ATP 酶（Na?/K?-ATPase）免疫熒光染色陽(yáng)性率達(dá) 97%，尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶（UGT）活性維持在原代腎細(xì)胞的 85%；無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體及病毒污染，細(xì)胞純度達(dá) 98%，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價(jià)值：在腎臟生理功能研究中，NRK 細(xì)胞可形成完整的腎小管上皮屏障，跨上皮電阻（TEER）值穩(wěn)定在 420Ω?cm2 以上，對(duì)鈉離子的重吸收能力達(dá)原代腎小管細(xì)胞的 78%，可模擬正常腎小管的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能，為解析腎臟水鹽代謝機(jī)制提供理想模型。腎損傷機(jī)制研究方面，該細(xì)胞在慶da霉素刺激下，24 小時(shí)內(nèi)乳酸脫氫酶（LDH）釋放量增加 3.6 倍，活性氧（ROS）水平上升 4.2 倍，緊密連接蛋白 ZO-1 表達(dá)量減少 45%，能很好地模擬藥物性腎損傷的病理過(guò)程，助力腎毒性分子機(jī)制的探究。藥物篩選領(lǐng)域，該細(xì)胞對(duì)腎毒性藥物反應(yīng)敏感，經(jīng)shun鉑類似物處理后，細(xì)胞存活率下降 52%，凋亡相關(guān)蛋白 Caspase-3 活性升高 3.8 倍，適用于評(píng)估新藥的潛在腎毒性及腎保護(hù)藥物的療效。此外，將該細(xì)胞與腎系膜細(xì)胞共培養(yǎng)，可構(gòu)建體外腎臟微環(huán)境模型，用于研究腎小管 - 系膜細(xì)胞間的相互作用。
科研應(yīng)用價(jià)值：在腎臟生理功能研究中，NRK 細(xì)胞可形成完整的腎小管上皮屏障，跨上皮電阻（TEER）值穩(wěn)定在 420Ω?cm2 以上，對(duì)鈉離子的重吸收能力達(dá)原代腎小管細(xì)胞的 78%，可模擬正常腎小管的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能，為解析腎臟水鹽代謝機(jī)制提供理想模型。腎損傷機(jī)制研究方面，該細(xì)胞在慶da霉素刺激下，24 小時(shí)內(nèi)乳酸脫氫酶（LDH）釋放量增加 3.6 倍，活性氧（ROS）水平上升 4.2 倍，緊密連接蛋白 ZO-1 表達(dá)量減少 45%，能很好地模擬藥物性腎損傷的病理過(guò)程，助力腎毒性分子機(jī)制的探究。藥物篩選領(lǐng)域，該細(xì)胞對(duì)腎毒性物質(zhì)反應(yīng)敏感，經(jīng)相關(guān)化合物處理后，細(xì)胞存活率差異顯著（35%-82%），適用于評(píng)估藥物的潛在腎毒性及腎保護(hù)藥物的療效。此外，將該細(xì)胞與腎系膜細(xì)胞共培養(yǎng)，可構(gòu)建體外腎臟微環(huán)境模型，用于研究腎小管 - 系膜細(xì)胞間的相互作用。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養(yǎng)基，添加 1% 非必需氨基酸、1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 3 天更換一次，更換時(shí)動(dòng)作輕柔以避免細(xì)胞脫落。傳代時(shí)采用含 EDTA 的溫和消化液處理，37℃孵育 7-10 分鐘，待細(xì)胞間隙增大后加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，傳代比例為 1:2-1:3，每 5-6 天傳代一次，維持細(xì)胞融合度在 70%-80% 以保持正常功能。凍存液配方為基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時(shí)→-80℃過(guò)夜→液氮保存）后，復(fù)蘇細(xì)胞存活率達(dá) 92% 以上，3-4 代內(nèi)可恢復(fù)正常的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能。運(yùn)輸采用 T-25 培養(yǎng)瓶活細(xì)胞運(yùn)輸，收到細(xì)胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時(shí)，更換培養(yǎng)基后觀察細(xì)胞形態(tài)，確認(rèn)無(wú)異常漂浮物后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞系僅限科研使用，禁止用于臨床診療相關(guān)研究。
NRK 正常大鼠腎細(xì)胞系以其穩(wěn)定的正常腎臟細(xì)胞功能、完整的代謝酶系統(tǒng)及易于培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)，在腎臟生理與病理研究及藥物研發(fā)中發(fā)揮著重要作用，為推動(dòng)腎臟相關(guān)領(lǐng)域研究的發(fā)展提供了可靠的細(xì)胞工具。
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