HEC-1-B [HEC-1B]人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系
HEC-1-B [HEC-1B]人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系是研究子宮內(nèi)膜腺癌的重要模型，以典型的腺上皮形態(tài)、激素受體表達特征及穩(wěn)定的惡性表型為核心，在子宮內(nèi)膜腺癌的發(fā)病機制、激素調(diào)控及藥物研發(fā)中應(yīng)用廣泛，為解析子宮內(nèi)膜腺癌從正常內(nèi)膜上皮惡變到侵襲轉(zhuǎn)移的過程提供了可靠實驗工具。
來源與背景：該細(xì)胞系于 1968 年從一名 65 歲女性子宮內(nèi)膜腺癌患者的手術(shù)標(biāo)本中分離建立，屬于中分化子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系。與低分化細(xì)胞系相比，其保留了更多子宮內(nèi)膜腺上皮的分化特征，更貼近臨床中分化腺癌的生物學(xué)特性，尤其適合研究子宮內(nèi)膜腺癌的分化調(diào)控機制。作為首ge被廣泛應(yīng)用的子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系，其長期傳代后仍保持穩(wěn)定的激素受體表達，填bu了子宮內(nèi)膜腺癌激素響應(yīng)研究模型的空白，至今仍是該領(lǐng)域機制研究和藥物篩選的常用參照。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈現(xiàn)典型腺上皮特征，多邊形或立方形，排列呈腺管狀或片狀貼壁生長，細(xì)胞間連接緊密，形成類似腺體的結(jié)構(gòu)，細(xì)胞質(zhì)豐富，可見分泌顆粒，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，核仁清晰，核質(zhì)比約 1:1.8，具有子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞的典型形態(tài)。核心特性體現(xiàn)為激素受體表達，表達雌激素受體（ER）和孕激素受體（PR），其中 ER 陽性率約 60%，PR 陽性率約 50%，對雌激素刺激有增殖響應(yīng)，模擬臨床中分化子宮內(nèi)膜腺癌的激素依賴性特征；惡性增殖與侵襲能力，體外培養(yǎng)倍增時間約 36-48 小時，克隆形成率約 55%，裸鼠皮下接種成瘤率 100%，且腫瘤組織呈現(xiàn)腺樣結(jié)構(gòu)，Transwell 實驗中穿透基質(zhì)膜的細(xì)胞數(shù)是正常子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的 4-6 倍，具有明確的侵襲轉(zhuǎn)移潛能；上皮標(biāo)志物穩(wěn)定，高表達細(xì)胞角蛋白（CK7、CK18），低表達波形蛋白，符合腺上皮的分子表型。傳代時需常規(guī)消化液處理 3-4 分鐘，因貼壁較牢固，傳代比例 1:3-1:5，連續(xù)傳代 60 次后仍保持激素受體表達及增殖特性，但侵襲能力可能略有下降。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 McCoy's 5A 培養(yǎng)基，添加 1% 抗菌混合液以維持細(xì)胞活性。培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度，每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基，細(xì)胞密度維持在 20%-70%，過度匯合會導(dǎo)致腺管結(jié)構(gòu)解體，ER/PR 表達下調(diào) 15%-20%。對激素環(huán)境敏感，培養(yǎng)基中添加 17β- 雌二醇（10nM）可使增殖速率提升 25%，傳代時用含血清培養(yǎng)基終止消化以保護細(xì)胞間連接，凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清，復(fù)蘇后存活率可達 85% 以上，24 小時貼壁率超 90%，激素響應(yīng)功能恢復(fù)正常。
檢測鑒定：經(jīng)微生物篩查，無支原體、細(xì)菌、真菌污染，符合實驗細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)。免疫熒光顯示 CK7、CK18 陽性率超 90%，ER 和 PR 呈細(xì)胞核陽性，符合子宮內(nèi)膜腺上皮表型。染色體核型分析為亞三倍體，存在 1 號染色體長臂擴增、10 號染色體缺失等異常，與 45% 的子宮內(nèi)膜腺癌患者遺傳學(xué)改變吻合。功能驗證中，雌激素處理后細(xì)胞周期 S 期比例增加，Ki-67 表達上調(diào)，證實其激素依賴增殖特性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在發(fā)病機制研究中，用于揭示雌激素驅(qū)動的癌變機制，研究發(fā)現(xiàn) ER 通過激活 cyclin D1 促進細(xì)胞周期進展，同時上調(diào) VEGF 促進血管生成，為理解 “激素信號 - 增殖 - 血管生成" 協(xié)同作用提供線索。在藥物篩選方面，是評估內(nèi)分泌治療藥物（如抗雌激素類）療效的常用模型，通過檢測藥物對細(xì)胞增殖、ER/PR 表達的影響，篩選有效治療藥物，聯(lián)合靶向藥物可增強抑制效果。在侵襲機制研究中，其高表達基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2、MMP-9），可降解子宮內(nèi)膜基質(zhì)，促進侵襲，靶向抑制這些酶可使侵襲能力下降 50%，為開發(fā)抗轉(zhuǎn)移藥物提供靶點。此外，該細(xì)胞系可用于研究腫瘤微環(huán)境的影響，與子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)后，其 ER 表達上調(diào)，對內(nèi)分泌治療敏感性增加，證實微環(huán)境對激素響應(yīng)的調(diào)控作用。
與其他子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系（如 Ishikawa）相比，HEC-1-B 的優(yōu)勢在于其中分化表型和穩(wěn)定的激素響應(yīng)，能更真實模擬臨床中分化腺癌的特征，為子宮內(nèi)膜腺癌的 “激素調(diào)控 - 分化狀態(tài) - 惡性進展" 關(guān)聯(lián)研究提供了理想模型，推動該疾病精準(zhǔn)治療策略的發(fā)展。
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