INS1大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞系
INS1大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞系作為從大鼠胰島 β 細(xì)胞瘤中分離建立的細(xì)胞模型，因能穩(wěn)定分泌胰島素且對(duì)葡萄糖刺激有良好反應(yīng)，在糖尿病發(fā)病機(jī)制、胰島 β 細(xì)胞功能調(diào)控及相關(guān)藥物研發(fā)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，是研究胰島 β 細(xì)胞生理與病理變化的重要工具。
細(xì)胞特性與來(lái)源背景：該細(xì)胞系源于大鼠自發(fā)性胰島細(xì)胞瘤，經(jīng)原代培養(yǎng)和篩選獲得。在顯微鏡下，細(xì)胞呈上皮樣形態(tài)，多為多邊形或短梭形，胞質(zhì)豐富，部分細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)細(xì)小的分泌顆粒，約 10%~15% 的細(xì)胞會(huì)聚集形成類似胰島的細(xì)胞團(tuán)。其生長(zhǎng)方式為貼壁生長(zhǎng)，傳代后 24 小時(shí)貼壁率可達(dá) 85% 以上，生長(zhǎng)狀態(tài)穩(wěn)定。
核心特性表現(xiàn)顯著：倍增時(shí)間約為 72 小時(shí)，連續(xù)傳代 40 次后仍能保持較穩(wěn)定的生物學(xué)特性；胰島 β 細(xì)胞特異性標(biāo)志物表達(dá)明顯，胰島素、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 2（GLUT2）免疫熒光染色陽(yáng)性率分別達(dá) 90% 和 88%，而胰高血糖素等其他胰島細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)陰性；在葡萄糖刺激下，胰島素分泌功能突出，當(dāng)葡萄糖濃度從 5.6mM 升至 16.7mM 時(shí)，胰島素釋放量可增加 4~5 倍，這一特性使其在相關(guān)研究中具有不可替代的優(yōu)勢(shì)；細(xì)胞無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體等污染，純度達(dá) 95% 以上，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價(jià)值：在糖尿病機(jī)制研究中，INS1 細(xì)胞是理想的模型。將其置于高糖（25mM）環(huán)境中培養(yǎng) 1 周，細(xì)胞凋亡率會(huì)上升 30%，胰島素分泌量下降 25%，同時(shí)參與胰島素信號(hào)傳導(dǎo)的關(guān)鍵分子磷酸化水平顯著降低，能很好地模擬高糖誘導(dǎo)的胰島 β 細(xì)胞功能損傷過(guò)程，為探究糖尿病中 β 細(xì)胞功能衰竭的機(jī)制提供有力支持。
在藥物篩選方面，該細(xì)胞對(duì)多種影響胰島功能的藥物反應(yīng)敏感。例如，經(jīng) GLP-1 類似物處理后，細(xì)胞胰島素分泌量可增加 30%，凋亡率下降 20%，可用于評(píng)估藥物對(duì)胰島 β 細(xì)胞的保護(hù)作用及療效。
此外，通過(guò)構(gòu)建 INS1 細(xì)胞與免疫細(xì)胞的共培養(yǎng)體系，能研究免疫因素對(duì)胰島 β 細(xì)胞的影響，為自身免疫性糖尿病的發(fā)病機(jī)制研究提供新的視角。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：培養(yǎng) INS1 細(xì)胞推薦使用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，同時(shí)添加 1mM 丙酮酸鈉、50μM β- 巰基乙醇和 1% 青mei素 - 鏈mei素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?的飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 2~3 天更換一次，以保證細(xì)胞獲得充足營(yíng)養(yǎng)。
傳代時(shí)，先用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液處理，37℃孵育 3~5 分鐘，待細(xì)胞間隙增大后，加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，傳代比例為 1:2~1:3，每 5~6 天傳代一次，避免細(xì)胞過(guò)度融合影響功能。
凍存時(shí)，凍存液采用培養(yǎng)基、胎牛血清和 DMSO 按 7:2:1 的比例配制，經(jīng)梯度降溫后放入液氮中保存，復(fù)蘇后細(xì)胞存活率可達(dá) 80% 以上，且 2~3 代后即可恢復(fù)正常的生長(zhǎng)和分泌功能。運(yùn)輸過(guò)程中采用 T-25 培養(yǎng)瓶活細(xì)胞運(yùn)輸，收到細(xì)胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時(shí)，更換培養(yǎng)基后觀察細(xì)胞狀態(tài)，確認(rèn)無(wú)異常后方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞系僅用于科研，使用時(shí)需遵守相關(guān)實(shí)驗(yàn)規(guī)范。
INS1 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞系憑借其穩(wěn)定的胰島素分泌功能和對(duì)葡萄糖的敏感反應(yīng)，在糖尿病研究及藥物開發(fā)中發(fā)揮著重要作用，為深入探索胰島 β 細(xì)胞的生理病理機(jī)制提供了可靠的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。
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