IEC-6大鼠小腸隱窩上皮細胞系
IEC-6大鼠小腸隱窩上皮細胞系作為源自大鼠小腸隱窩的上皮細胞模型，因保留腸道隱窩細胞的增殖分化特性及腸黏膜屏障功能，在腸黏膜修復機制、腸道疾病病理研究中應用廣泛，成為探究腸道上皮細胞生物學特性的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠正常小腸隱窩組織，經(jīng)原代培養(yǎng)和永生化處理建立。細胞形態(tài)呈典型上皮樣，多為圓形或短梭形，排列緊密呈鋪路石樣，胞質(zhì)內(nèi)可見豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，約 6% 細胞呈現(xiàn)雙核現(xiàn)象，細胞核呈圓形，核仁清晰。生長方式為貼壁生長，具有明顯接觸抑制，傳代后 24 小時貼壁率達 94%。核心參數(shù)表現(xiàn)出小腸隱窩細胞特征：倍增時間約 48 小時，連續(xù)傳代 50 次后仍保持正常二倍體核型（染色體數(shù) 42 條）；腸道上皮標志物細胞角蛋白 20（CK20）免疫熒光陽性率達 96%，絨毛蛋白（villin）表達豐富；增殖標志物 Ki-67 陽性率在對數(shù)生長期達 35%，顯著高于成熟腸上皮細胞；無微生物污染，細胞純度達 97%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在腸黏膜修復機制研究中，IEC-6 細胞經(jīng)表皮生長因子（EGF）處理 24 小時后，遷移能力提升 42%，增殖活性增強 38%，緊密連接蛋白 claudin-1 表達量增加 52%，可模擬腸黏膜損傷后的修復過程，為解析腸道修復機制提供理想模型。腸道疾病研究方面，該細胞在脂多糖（LPS）刺激下，腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）分泌量增加 4.8 倍，屏障功能指標跨上皮電阻（TEER）值下降 56%，能很好地模擬腸道炎癥狀態(tài)下的上皮損傷，助力腸道炎癥疾病的機制研究。在藥物篩選領域，該細胞對腸黏膜保護藥物反應敏感，經(jīng)谷an酰胺處理后，LPS 誘導的細胞凋亡率下降 40%，屏障功能恢復 35%，適用于評估藥物的腸道保護作用。此外，將該細胞與腸道菌群共培養(yǎng)，可構建體外腸道微生態(tài)模型，用于研究菌群與腸道上皮的相互作用。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，添加 1% 非必需氨基酸、1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 2-3 天更換一次，更換時動作輕柔以避免細胞脫落。傳代時采用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液處理，37℃孵育 5-7 分鐘，待細胞間隙增大后加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，傳代比例為 1:3-1:4，每 4-5 天傳代一次，維持細胞融合度在 70%-80% 以保持正常功能。凍存液配方為基礎培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復蘇細胞存活率達 91% 以上，3-4 代內(nèi)可恢復正常的增殖分化能力。運輸采用 T-25 培養(yǎng)瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時，更換培養(yǎng)基后觀察細胞形態(tài)，確認無異常漂浮物后進行后續(xù)實驗。該細胞系僅限科研使用，禁止用于臨床診療相關研究。
IEC-6 大鼠小腸隱窩上皮細胞系以其穩(wěn)定的腸道上皮功能、活躍的增殖特性及易于培養(yǎng)的優(yōu)勢，在腸道生理與病理研究及藥物研發(fā)中發(fā)揮著重要作用，為揭示腸道相關疾病的發(fā)病機制提供了可靠的細胞模型。
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