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阿利新藍(lán)染色(AB-PAS)

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阿利新藍(lán)染色(AB-PAS)
正常粘膜上皮能分泌中性和酸性粘液物質(zhì),中性粘液物質(zhì)含有氨基己糖和游離的己糖基,酸性粘液物質(zhì)也含有氨基己糖并含有各種酸根。此方法先染阿利新藍(lán)將酸性粘液物質(zhì)染為藍(lán)色,并阻斷酸性粘液物質(zhì)中羧酸分子的乙二醇被高碘酸氧化生產(chǎn)二醛與雪夫試劑反應(yīng)而著紅色。只有中性粘液物質(zhì)的乙二醇基被高碘酸生成二醛后與雪夫試劑中的無(wú)色品紅作用生成紅紫色復(fù)合物。

阿利新藍(lán)染色(AB-PAS)

服務(wù)原理:

正常粘膜上皮能分泌中性和酸性粘液物質(zhì),中性粘液物質(zhì)含有氨基己糖和游離的己糖基,酸性粘液物質(zhì)也含有氨基己糖并含有各種酸根。此方法先染阿利新藍(lán)將酸性粘液物質(zhì)染為藍(lán)色,并阻斷酸性粘液物質(zhì)中羧酸分子的乙二醇被高碘酸氧化生產(chǎn)二醛與雪夫試劑反應(yīng)而著紅色。只有中性粘液物質(zhì)的乙二醇基被高碘酸生成二醛后與雪夫試劑中的無(wú)色品紅作用生成紅紫色復(fù)合物。進(jìn)而將中性和酸性粘液物質(zhì)清楚地顯示出來(lái)。在正常胃腸粘液中,胃粘膜的表面上皮、幽門(mén)腺、十二指腸腺等主要為紅色中性粘液物質(zhì)。小腸及大腸粘膜的杯狀細(xì)胞和腸腺主要分泌酸性粘液物質(zhì)。

服務(wù)流程:

1、石蠟切片脫蠟至水。

2、切片阿利新藍(lán)染液滴染5-10min。稍水洗。

3、切片用高碘酸水溶液氧化10min。

4、流水沖洗數(shù)分鐘,蒸餾水洗兩次。

5、切片經(jīng)雪夫試劑滴染15~30min,此步驟需避光。

6、切片流水沖洗5-10min。  

7、切片稍甩干,Mayer蘇木素淺染細(xì)胞核1min左右,流水沖洗數(shù)分鐘。

8、梯度酒精脫水,二甲苯透明,中性樹(shù)膠封固。

染色結(jié)果:

糖原、中性粘液物質(zhì)呈紅色,酸性粘液物質(zhì)呈藍(lán)色,混合性粘液物質(zhì)呈藍(lán)紫色或紫藍(lán)色,胞核呈藍(lán)色。
注意事項(xiàng):

  1. 高碘酸溶液、雪夫試劑要放入冰箱避光保存,臨用前半小時(shí)取出恢復(fù)至室溫后使用,使用時(shí)也要避光
  2. 雪夫試劑出現(xiàn)淡紅色就不能繼續(xù)使用了。

3、雪夫試劑染色的時(shí)間隨溫度而定,夏季室溫高,可減少染色時(shí)間。冬季室溫低,可延長(zhǎng)至30min左右。

如果沒(méi)有要求,可以不染核,要染核的話染色一定要淺。因?yàn)樗嵝哉骋何镔|(zhì)著藍(lán)色,如果核藍(lán)色太深對(duì)比不明顯。

 

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