InertSustainSwift C18色譜柱操作說明

1.色譜柱信息

  InertSustainSwift C18液相色譜柱是在新型高純度球狀硅膠基質(zhì)上鍵合十八烷基的反相分離模式色譜柱，適合用于弱極性至中等極性例如合成藥物、中藥、多肽、有機酸等的分離。InertSustainSwift C18液相色譜柱從硅膠基質(zhì)的合成，到化學(xué)處理和裝填后的性能檢測，都是在本公司嚴格的產(chǎn)品控制下進行，因此不同批次的柱與柱之間具有優(yōu)異的重現(xiàn)性；通過獨有的裝填技術(shù)填裝的色譜柱柱床密度均一穩(wěn)定，從而確保色具有高柱效，硅膠粒徑分布均勻，確保柱壓極低。InertSustainSwift C18液相色譜柱采用改性硅膠基體，惰性化程度很高，端基封尾徹底，即使是酸性和堿性或者金屬配位性化合物化合物分析，也能保持良好的峰型，可以用于方法開發(fā)中反相ODS柱的首選色譜柱。

為了能長期保持InertSustainSwift C18液相色譜柱的優(yōu)越性能和正確的使用色譜柱，在使用色譜柱之前請仔細閱讀本說明書。

2.使用前的檢查與須知事項

●檢查包裝箱的外觀有無異常。

●打開包裝，檢查色譜柱的填料名稱、尺寸規(guī)格、連接型式是否相符。

●色譜柱中封存流動相為乙腈/水或者甲醇/水的混合物，具體比例請參考柱效報告。

3.色譜柱填料規(guī)格

4.色譜柱安裝與操作

  色譜柱在運輸過程中，兩端用堵頭密封。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時，首先請確保系統(tǒng)中的溶劑和液相柱中封存溶劑是互溶的。如果不能互溶，請采用一種能夠與系統(tǒng)及色譜柱都能互溶的溶劑對系統(tǒng)進行充分過渡之后再將色譜柱連接到系統(tǒng)中，并注意流動相的方向要與柱上標記的方向保持一致。我公司提供的常規(guī)液相色譜柱標準接頭型式為1/16英寸Waters接頭螺絲型(如下左圖)，同時還有耐高壓液相系統(tǒng)的UP型(如下右圖)，如果需要其他接頭型式請另行咨詢。

  色譜柱連接好之后，請確認無漏液現(xiàn)象之后再進行后續(xù)操作。

  新的InertSustain C18柱是保存在乙腈/水或者甲醇/水的混合溶液中，在儲存和運輸過程中，硅膠填料可能會干涸，推薦用純的甲醇或乙腈沖洗10~20倍柱體積對色譜柱進行活化，流速從0.1mL/min緩慢上升到最佳流速。(如果在活化過程中即發(fā)現(xiàn)壓力和基線不正常時，請及時聯(lián)系我公司工程師及時處理。)然后再用不含緩沖鹽的流動相進行平衡20倍柱體積，

再用流動相平衡，待壓力和基線穩(wěn)定之后，再進樣分析。

5.樣品與流動相

  為避免色譜柱堵塞，所有樣品及溶劑，包括緩沖溶液在內(nèi)，在使用前必須用0.45μm或者0.22μm的濾膜過濾。InertSustainSwift C18色譜柱耐純水能力強，可以使用純水或者純的緩沖鹽水溶液作為流動相。

6.色譜柱的保養(yǎng)

●pH InertSustainSwift C18色譜柱可在pH1~10范圍內(nèi)使用，為保持色譜柱良好的壽命，請避免較強的酸或堿性樣品或者流動相進入色譜柱。

●耐壓 常規(guī)色譜柱耐受壓力為20MPa，HP系列耐壓為50MPa，UHPLC系列耐受80MPa，但是正常的壓力建議控制在耐受壓力的2/3以下。長時間在高壓下運行會對色譜柱造成難以修復(fù)的損害，因此系統(tǒng)壓力升高之后，建議盡快排查系統(tǒng)，如果是色譜柱壓力升高，請及時采用適當(dāng)溶劑沖洗色譜柱。

●溫度 最高操作溫度為60℃，長時間在高溫下操作會顯著降低色譜柱壽命。

●沖洗 新柱是保存在高比例的有機溶劑中，如果是采用緩沖鹽流動相的情況下，做樣之前請務(wù)必用比緩沖鹽稍高比例的水充分過渡，然后再用流動相平衡。每天做樣完畢之后，應(yīng)充分沖洗色譜柱，首先用稍高比例的水相沖洗，例如乙腈/水=10：90(v/v)沖洗20倍柱體積，然后用乙腈或者高比例的乙腈/水混合溶液沖洗20倍柱體積，最后保存在此流動相下，其中沖洗用的水相也可以添加一定比例的酸，例如0.1%的甲酸、乙酸或者磷酸等等，可能會有更好的清洗效果。如果是做蛋白質(zhì)、多肽類易吸附的樣品，為了不讓細孔內(nèi)部變性，建議采取含三氟乙酸的流動相梯度沖洗，反復(fù)沖洗三次以上。

●反沖 如果色譜柱用久了之后，有明顯的雜質(zhì)吸附或者柱壓明顯升高，建議可以采取反沖方法沖洗色譜柱。具體方法如下：柱子反接，不接檢測器，乙腈/水=10：90(v/v)，沖洗50倍柱體積，之后100%乙腈沖洗50倍柱體積。流速采用平時分析流速的1/3，然后正接，乙腈/水=10：90(v/v)，沖洗10倍柱體積，然后用流動相平衡做樣。

●儲存 色譜柱長期不用，建議日常沖洗方法完成之后，再用純乙腈或者甲醇沖洗20倍柱體積，然后保存在該流動相條件下，之后卸掉色譜柱，兩端用堵頭密封，并放在溫度變化小的場所。