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關鍵詞:抗體定制服務|實驗技術服務
簡介:世界*品牌抗體定制服務|實驗技術服務原裝,質量保證,*。
抗體定制|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經(jīng)驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌:抗體定制服務|實驗技術服務
測序實驗流程:
抗體檢測服務
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實驗)
Dot Blot(斑點印跡實驗)
Western Blot(免疫印跡實驗)
IHC (免疫組織化學實驗)
抗體標記服務
HRP(辣根過氧化物酶)
Biotin(生物素)
實驗流程:
第0天: 進行*次免疫
第1-10天: 加強免疫
第14天: ELISA測定血清滴度
第18天: 融合
第36天: 克隆初篩
第40天: 克隆復篩
第46天: 克隆擴增,提供培養(yǎng)上清
原
制備 提供多肽序列,或Genbank號,公司負責合成多肽,偶聯(lián)KLH及偶聯(lián)檢測載體BSA(OVA) 2周 多肽合成,10mg純度>95% ¥128/A
偶聯(lián)KLH 2mg ¥1280
偶聯(lián)BSA(或者OVA) 2mg ¥780
客戶只提供Genbank號 4周 構建含有客戶認可抗原序列的原核表達載體,進行蛋白表達純化,制備可供免疫的抗原 ¥4000
客戶提供能正常表達的菌株 2周 進行表達、純化制備免疫抗原 ¥2000
客戶選擇真核表達 4周 構建含有Flag標簽的真核表達載體,293細胞表達目的抗原,用偶聯(lián)Flag單抗的beads親和純化目的融合蛋白作為抗原 詢價
提取天然蛋白 2周 提取天然蛋白zui為抗原 詢價
免疫 三次免疫后(效價達不到融合要求繼續(xù)免疫)測尾血效價 5周 免疫5只Bablc小鼠,免疫量50ug/只,zui終達到融合效價>1:10000 ¥1000
加強
免疫 融合前3-5天加強免疫 1天 蛋白透析,無佐劑50ug/只 ¥50
融合 PEG1450 (sigmaP7306)
HAT(Invitrogen 21060017 )血清(Hyclone SH30084.03 ) 1天 取脾臟分離成單細胞與對數(shù)期的SP2/0按5:1混合,進行細胞融合,20%胎牛血清,HAT選擇培養(yǎng)基,鋪10塊96孔板 ¥5000
上清
檢測 融合7天后,ELISA檢測,用檢測抗原包被ELISA板,二抗anti-mouse HRP,TMB顯色 1天 陰性(正常培養(yǎng)基)OD<0.1陽性OD>0.5視為陽性孔 ¥2000
亞克隆 對陽性孔采用有限稀釋法進行亞克隆直到含有細胞的所有孔均為陽性 4周 ELISA檢測挑選OD值高的細胞孔,進行后續(xù)亞克隆直到含有細胞的所有孔均為陽性 ¥8000
定株 陽性穩(wěn)定的孔進行擴大培養(yǎng) 1周 擴大培養(yǎng)上清,按客戶要求進行功能檢測(WB/ELISA/IHC),滿足客戶要求后,將應客戶要求交付細胞(每株細胞2管) ¥5000
腹水 細胞株生產10mL腹水 1周 離心后10mL腹水 ¥2000
亞型 應客戶要求測定細胞株亞型 1周 采用(Sigma ISO2)測定亞型 ¥2000
純化 ProteinA 或G純化10mL腹水 1周 根據(jù)亞型選擇ProteinA 或G ¥2000
配對 純化后的抗體進行競爭實驗 3周 確定不同克隆之間是否配對 詢價
標記 FITC/HRP/BIOTIN/AP等 1周 應客戶要求對抗體進行標記 詢價
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