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更新時間：2025-01-03 16:50:05瀏覽次數(shù)：476
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CTR-KO CRE-Luc HEK293 CTR-KO CRE-Luc HEK293
| I. Background | |
降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)家族包括 CGRP 本身、降鈣素(CT)、腎上腺髓質(zhì)素(AM)和 胰島淀粉樣肽(AMY)。 胰淀素（Amylin）受體的三種類型的已被確定，即 AMY1，AMY2 和 AMY3。胰淀素 受體屬于 B 類 GPCR，是異二聚體復合物，由降鈣素受體(CTR)與受體活性修飾蛋白 (RAMPs)結(jié)合形成。該受體的 CTR 組分具有相同的 GPCR 結(jié)構(gòu)：7 個跨膜相互連接的α-螺 旋，將細胞外信號傳遞到細胞內(nèi)細胞質(zhì)信號級聯(lián)。RAMP 有三種類型(RAMP1、RAMP2 和 RAMP3)，它們共享 31%的氨基酸序列，具有相似的基本結(jié)構(gòu)。RAMP 是將 CTR 轉(zhuǎn)運到細 胞膜并調(diào)節(jié)其配體特異性的重要肽，它可以改變特定 GPCR 的藥理學、功能和細胞運輸。 哺乳動物細胞中 Amylin 受體的激活已被證明可以提高 cAMP，并被認為與 Gs 蛋白和 腺苷酸環(huán)化酶的刺激有關(guān)。在 RAMPs 的存在下，其與胰淀素的結(jié)合親和力可以被修飾。 CTR 和 RAMP1 或 CTR 和 RAMP3 的異質(zhì)結(jié)構(gòu)被認為有利于與胰淀素結(jié)合，介導大腦中的 生理功能。AMY3 的激活刺激 G 蛋白 Gαs，進一步控制腺苷酸環(huán)化酶(AC)，隨后增加細胞 cAMP。cAMP 與 PKA 調(diào)控亞基(R2)的結(jié)合誘導 PKA 四聚體全酶解離，導致 PKA 催化亞 基的激活。cAMP 激活的 PKA 參與調(diào)控 ERK1/2 的活性。ERK1/2 通路的觸發(fā)可能導致 Ca 2+ 分布不均勻，引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體功能障礙，導致細胞死亡。此外，cAMP 刺激 AKT 進一 步導致轉(zhuǎn)錄因子 cFos 的表達。 | |
| II. Description | |
CTR-KO CRE-Luc HEK293 藥靶模型細胞可以用于 CTR 激動劑的選擇性檢測評價，以 確定候選激動劑是否為 CTR 的特異性激動劑，原理見圖 1 所示。
Figure 1. CTR-KO CRE-Luc HEK293 細胞模型原理圖 | |
| II. Introduction | |
| Expressed gene: | CTR-KO |
| Stability: | 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | DMEM+10%FBS+200μg/ml hygromycin |
| Mycoplasma Testing: | Negative |
| Storage: | Liquid nitrogen |
| Application(s): | Functional assay for CTR-KO receptor |
| Transducer: | Gs |
III. Representative Data
Figure 2. Sanger of CTR-KO CRE-Luc HEK293
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Figure 3. HTRF caMP Assay with CTR-KO CRE-Luc HEK293(3C14).
