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中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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奧林巴斯進(jìn)口顯微鏡CX43組織切片觀察步驟

時(shí)間:2025/1/21閱讀:89
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使用奧林巴斯進(jìn)口顯微鏡 CX43 進(jìn)行組織切片觀察,一般可按照以下步驟進(jìn)行:

準(zhǔn)備工作

準(zhǔn)備好已經(jīng)處理好的組織切片,確保切片經(jīng)過(guò)固定、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片和染色等一系列常規(guī)組織學(xué)處理步驟,常見(jiàn)的染色方法如 HE 染色,以便于觀察組織結(jié)構(gòu)。

清潔顯微鏡的載物臺(tái)、物鏡、目鏡等部件,確保無(wú)灰塵、污漬等影響觀察的因素。接通顯微鏡電源,打開(kāi)光源,調(diào)節(jié)亮度旋鈕,將光源亮度調(diào)至適中,為后續(xù)觀察做好準(zhǔn)備。

放置切片

將組織切片放在顯微鏡的載物臺(tái)上,用載物臺(tái)上的玻片夾固定好切片,確保切片不會(huì)在觀察過(guò)程中移動(dòng)。

通過(guò)載物臺(tái)的移動(dòng)旋鈕,將切片移動(dòng)到物鏡下方,使需要觀察的區(qū)域大致處于視野中心位置。

低倍鏡觀察

轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器,將低倍物鏡(通常為 4 倍或 10 倍)轉(zhuǎn)至工作位置,使物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔。

從側(cè)面注視物鏡,同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使載物臺(tái)緩慢上升,直到物鏡接近切片(注意不要讓物鏡碰到切片,一般距離切片約 0.5 - 1 厘米)。

從目鏡中觀察,緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使載物臺(tái)下降,直到看到模糊的圖像。再轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,使圖像清晰。

利用載物臺(tái)的移動(dòng)旋鈕,在低倍鏡下觀察整個(gè)組織切片,了解切片的整體結(jié)構(gòu)和大致形態(tài),確定需要進(jìn)一步觀察的重點(diǎn)區(qū)域。

高倍鏡觀察

將低倍鏡下確定的重點(diǎn)觀察區(qū)域移至視野中央。

轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器,換用高倍物鏡(通常為 40 倍或更高倍數(shù))。由于高倍物鏡的工作距離較短,此時(shí)不能再使用粗準(zhǔn)焦螺旋,只能通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋來(lái)微調(diào)焦距,使圖像清晰。

在高倍鏡下仔細(xì)觀察組織切片的細(xì)節(jié),如細(xì)胞形態(tài)、大小、排列方式,細(xì)胞核的形態(tài)、染色質(zhì)分布,以及細(xì)胞間質(zhì)的結(jié)構(gòu)等,注意觀察是否存在異常細(xì)胞或病變區(qū)域。

調(diào)節(jié)光線

根據(jù)組織切片的染色情況和觀察需求,調(diào)節(jié)顯微鏡的光線。可以通過(guò)調(diào)節(jié)孔徑光闌來(lái)控制進(jìn)入物鏡的光線量,孔徑光闌開(kāi)大,光線增強(qiáng),圖像對(duì)比度降低;孔徑光闌縮小,光線減弱,圖像對(duì)比度增加。

還可以通過(guò)調(diào)節(jié)視場(chǎng)光闌來(lái)控制視野的亮度和范圍,避免周圍雜散光的干擾,使觀察視野更加清晰。

特殊觀察及記錄

如果需要進(jìn)行特殊觀察,如相差觀察、熒光觀察等,可根據(jù)顯微鏡的操作說(shuō)明,切換相應(yīng)的觀察模式,并選擇合適的濾光片等配件。

使用顯微鏡配備的圖像采集系統(tǒng)(如數(shù)碼攝像頭)或連接電腦,拍攝觀察到的圖像,記錄下有價(jià)值的觀察結(jié)果,以便后續(xù)分析、討論和報(bào)告撰寫。

觀察結(jié)束

觀察完畢后,轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器,將物鏡轉(zhuǎn)離通光孔,取下組織切片。

關(guān)閉顯微鏡光源和電源,清理顯微鏡,將顯微鏡恢復(fù)到初始狀態(tài),妥善保管。


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