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奧林巴斯 BX43 正置生物教學(xué)顯微鏡的應(yīng)用技術(shù)如下:
奧林巴斯BX43顯微鏡明場觀察技術(shù)
樣品準(zhǔn)備:將生物樣品制作成薄片或涂片,如植物葉片切片、動物組織切片等,放置在載玻片上,蓋上蓋玻片。若觀察液體樣品,可使用懸滴法或涂片法固定在載玻片上。
操作要點(diǎn):將顯微鏡從防塵罩或包裝盒內(nèi)取出,一手托住顯微鏡底座,另一手握住顯微鏡鏡臂,將其平穩(wěn)地放置在實(shí)驗(yàn)臺或工作臺上。連接電源,按下顯微鏡的電源開關(guān)和光源開關(guān),根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)節(jié)光源的亮度。轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)盤,選擇合適倍數(shù)的物鏡對樣品進(jìn)行觀察,通常從低倍物鏡開始,如 4X 或 10X,以觀察樣品的整體形態(tài)。通過粗調(diào)旋鈕快速移動載物臺,使樣品接近物鏡,再使用微調(diào)旋鈕進(jìn)行精確調(diào)焦,直到獲得清晰的圖像2。
奧林巴斯BX43顯微鏡相差觀察技術(shù)
樣品準(zhǔn)備:對于活細(xì)胞或未染色的透明樣品,如培養(yǎng)的細(xì)胞、微生物等,無需進(jìn)行復(fù)雜的染色處理,直接將其放置在載玻片上,用蓋玻片覆蓋即可。
操作要點(diǎn):安裝相差模塊,確保相差環(huán)板與物鏡相匹配。將樣品放置在載物臺上,按照明場觀察的方法進(jìn)行初步對焦。調(diào)節(jié)聚光鏡的高度和孔徑光闌,使相差效果佳,以增強(qiáng)樣品的對比度,使細(xì)胞的輪廓、內(nèi)部結(jié)構(gòu)等更清晰地顯示出來。
奧林巴斯BX43顯微鏡熒光觀察技術(shù)
樣品準(zhǔn)備:對需要觀察的生物樣品進(jìn)行熒光標(biāo)記,可使用熒光染料對細(xì)胞中的特定成分進(jìn)行染色,如用 DAPI 染細(xì)胞核;或通過基因工程手段使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白,如綠色熒光蛋白(GFP)等。將標(biāo)記好的樣品固定在載玻片上,蓋上蓋玻片。
操作要點(diǎn):安裝熒光模塊,選擇合適的熒光濾光片組,以匹配所使用的熒光染料或熒光蛋白的激發(fā)和發(fā)射波長。打開熒光光源,調(diào)節(jié)光源強(qiáng)度。將樣品放置在載物臺上,對焦后觀察熒光信號,注意避免熒光淬滅,可適當(dāng)縮短觀察時(shí)間或降低光源強(qiáng)度6。
奧林巴斯BX43顯微鏡偏光觀察技術(shù)
樣品準(zhǔn)備:對于具有雙折射性質(zhì)的樣品,如晶體、纖維等,將其切成薄片或制成適當(dāng)?shù)男螤?,放置在載玻片上。
操作要點(diǎn):安裝偏光模塊,包括起偏器和檢偏器。將樣品放置在載物臺上,先將起偏器和檢偏器的偏振方向調(diào)整為相互垂直,形成暗場背景。轉(zhuǎn)動載物臺,觀察樣品在不同角度下的光學(xué)各向異性現(xiàn)象,如晶體的消光、干涉色等,以分析樣品的晶體結(jié)構(gòu)、纖維取向等信息。
奧林巴斯BX43顯微鏡圖像記錄與分析技術(shù)
設(shè)備連接:將顯微鏡與攝像頭系統(tǒng)連接,可通過 USB 接口或其他專用接口將攝像頭與計(jì)算機(jī)連接。
操作要點(diǎn):打開圖像采集軟件,設(shè)置采集參數(shù),如分辨率、曝光時(shí)間、增益等。在顯微鏡下觀察到清晰的圖像后,使用軟件中的拍攝功能記錄圖像或視頻。利用圖像分析軟件對采集到的圖像進(jìn)行測量、分析,如測量細(xì)胞的大小、計(jì)算熒光強(qiáng)度、分析圖像的對比度和清晰度等。
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