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中級會(huì)員 | 第9年

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實(shí)驗(yàn)室切向流過濾系統(tǒng)的作用及如何選擇濾膜包

時(shí)間:2025/7/9閱讀:143
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Tanfil100 TFF切向流過濾系統(tǒng)1.png

                                   洛科/Rocker   Tanfil100 TFF切向流過濾系統(tǒng)


選擇切向流過濾(TFF)系統(tǒng)的濾膜包需綜合考量分離目標(biāo)、樣品特性、工藝規(guī)模及設(shè)備兼容性。以下是關(guān)鍵選配要點(diǎn):

 

一、根據(jù)分離目標(biāo)選擇膜孔徑與截留分子量(MWCO

目標(biāo)分子定位?

截留目標(biāo)物?(如濃縮蛋白質(zhì)):選擇MWCO為 ?目標(biāo)分子量的1/3~1/5?(例如目標(biāo)蛋白100kDa,選30-50kDa膜包)?。

透過目標(biāo)物?(如去除小分子雜質(zhì)):選MWCO為 ?目標(biāo)分子量的5-10倍?(例如收集10kDa多肽,選50-100kDa膜包)?。

分離不同分子?:需確保分子量差異 ?≥10倍? 才能有效分離?。

 

常見應(yīng)用場景對應(yīng)膜孔徑?

細(xì)胞采集/澄清:?0.1-0.65μm微濾膜?(去除細(xì)菌、細(xì)胞碎片)?。

蛋白質(zhì)濃縮:?10-100kDa超濾膜?(如單抗、酶)?。

病毒/外泌體純化:?100-1000kDa超濾膜?(如腺病毒、外泌體截留)?。

二、膜材質(zhì)選擇:兼容性與吸附性

 

不同材質(zhì)影響回收率、耐化學(xué)性及成本:

材質(zhì)類型? ?      特點(diǎn)? ?                                            適用場景?

聚醚砜(PES)? 高化學(xué)耐受性(耐酸堿、乙醇),但蛋白吸附較強(qiáng) 常規(guī)蛋白、多糖濃縮?

再生纖維素(RC)? 低蛋白吸附,適合敏感樣品,但機(jī)械強(qiáng)度較低 抗體、易失活蛋白?

改性聚醚砜(如Omega膜)? 低吸附、高回收率,可重復(fù)使用 高價(jià)值生物制品(如疫苗、治療性蛋白)?

三醋酸纖維素(CTA)? 親水性強(qiáng),適合水相樣品 核酸、小分子脫鹽?

 

?提示?:若樣品易吸附,優(yōu)先選RC或表面改性膜(如Hydrosart®)?。

 

 三、膜包規(guī)格與系統(tǒng)匹配

有效面積與處理體積?

實(shí)驗(yàn)室級:選?cm2膜包?(如Minimate系統(tǒng),可并聯(lián)個(gè))]。

中試級:選?0.09-0.46m2膜包?(如Centramate系統(tǒng),可并聯(lián)個(gè))]。

 

通道結(jié)構(gòu)與死體積?

高粘度樣品:選?寬流道膜包?(減少堵塞)。

小體積樣品:測量系統(tǒng)?死體積?(管路+膜包內(nèi)部),避免樣品損失5]。


 四、工藝參數(shù)與維護(hù)要求

. ?操作條件適配性?

高剪切敏感樣品:降低切向流速,避免分子失活]

高固含量樣品:選用?開放式流道設(shè)計(jì)?,減少濃差極化]。

清洗與壽命?

常規(guī)清洗:?0.1-1M NaOH?(水解蛋白)或 ?.M磷酸?(除無機(jī)鹽)5]。

重復(fù)利用:改性PES膜(如Pall Omega膜)可耐受多次CIP(原位清洗)5]。

 五、選型流程總結(jié)

明確分離目標(biāo)?→ 2. ?計(jì)算MWCO/孔徑?→ . ?篩選材質(zhì)?→ . ?匹配系統(tǒng)規(guī)模?→ 5. ?驗(yàn)證清洗兼容性?。

 

???注意事項(xiàng)?:

 

膜包與設(shè)備需?同品牌兼容?(如Pall Minimate僅兼容Omega膜)?;

shou次使用前需?預(yù)處理膜包?(純水沖洗,排除保存液)?。

 

通過綜合以上維度,可優(yōu)化分離效率并降低成本。實(shí)際選型建議結(jié)合預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證膜通量及回收率?。


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