12
NADPH ELISA
NADPH ELISA技術(shù)原理基于抗原抗體間的特異性結(jié)合反應(yīng)。在實驗中，首先將針對 NADPH 的特異性抗體包被在固相載體（如酶標板）表面。當加入含有 NADPH 的樣本時，樣本中的 NADPH 會與固相抗體發(fā)生特異性結(jié)合。隨后加入酶標記的另一種 NADPH 特異性抗體，從而形成 “固相抗體 - NADPH - 酶標抗體" 的免疫復(fù)合物。在經(jīng)過多次洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，向反應(yīng)體系中加入酶的底物。酶標抗體上的酶能夠催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，且顏色的深淺與樣本中 NADPH 的含量呈正相關(guān)關(guān)系。通過酶標儀測定特定波長下反應(yīng)體系的吸光度，再依據(jù)事先繪制好的標準曲線，即可準確計算出樣本中 NADPH 的濃度。
該技術(shù)的操作流程較為規(guī)范且精細。樣本需經(jīng)過預(yù)處理，確保其適合進行 ELISA 檢測。之后依次進行加樣、孵育、洗滌、加酶標抗體、再次孵育、洗滌以及加底物顯色等步驟。每一步驟的反應(yīng)時間、溫度以及試劑的使用量都需要嚴格把控，以保障實驗結(jié)果的準確性與可重復(fù)性。
NADPH試劑盒技術(shù)在多個領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用。在基礎(chǔ)生物學研究中，可用于探究細胞代謝途徑、氧化應(yīng)激反應(yīng)等過程中 NADPH 的動態(tài)變化。在醫(yī)學領(lǐng)域，它有助于研究某些疾病的發(fā)病機制，例如在腫瘤細胞中，NADPH 代謝異常與腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，通過檢測 NADPH 含量可為腫瘤的診斷與治療提供新思路。此外，在藥物研發(fā)過程中，該技術(shù)可用于評估藥物對 NADPH 相關(guān)代謝通路的影響，為篩選有效的治療藥物提供數(shù)據(jù)支撐。