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OFQ ELISA
OFQ ELISA，即針對孤啡肽（OFQ）開展的酶聯(lián)免疫吸附測定技術，在神經科學研究以及多種相關疾病的探索中發(fā)揮著關鍵作用。孤啡肽是一種內源性神經肽，在中樞神經系統(tǒng)中廣泛分布，參與調節(jié)痛覺、情緒、認知、內分泌以及心血管功能等諸多生理過程，其含量變化與多種神經精神疾病及其他系統(tǒng)病癥密切相關。
該技術基于抗原與抗體特異性結合的免疫學原理。在 OFQ 試劑盒中，酶標板已預先包被針對 OFQ 的特異性抗體。當含有 OFQ 的樣本，如腦脊液、血漿、組織勻漿或細胞培養(yǎng)上清等加入酶標板孔后，樣本中的 OFQ 會迅速與包被抗體特異性結合。隨后加入酶標記的另一種針對 OFQ 不同抗原表位的檢測抗體，二者結合形成穩(wěn)定的 “包被抗體 - OFQ - 酶標抗體" 三明治結構。接著添加酶的底物，酶標抗體上的酶催化底物發(fā)生化學反應，產生可檢測的信號，常見為顏色變化或熒光信號。通過酶標儀測量信號強度，并與試劑盒提供的標準曲線對比，即可精確計算出樣本中 OFQ 的含量。
OFQ 試劑盒組成較為全面，一般包含預包被抗體的酶標板，不同濃度的 OFQ 標準品用于制作標準曲線，酶標抗體工作液、底物、終止液，以及用于清洗未結合物質的濃縮洗滌液等。同時，配備詳細的操作說明書，為實驗人員提供準確的操作指導，涵蓋樣本采集、處理、實驗步驟以及結果判讀等各個環(huán)節(jié)。
在操作流程上，首先要根據(jù)實驗需求采集合適的樣本，例如研究神經系統(tǒng)相關問題時，腦脊液樣本較為常用；而在全身性疾病研究中，血漿樣本可能更為合適。采集后的樣本需及時進行離心等處理以獲取清亮的待測液。將樣本和試劑盒中的試劑平衡至室溫后，嚴格按照要求對樣本及試劑進行準確稀釋。然后精確加樣到酶標板，在適宜溫度下溫育一段時間，確保抗原抗體充分反應。之后用洗滌液多次洗滌酶標板，徹di去除未結合物質，減少非特異性信號干擾。接著依次加入酶標抗體工作液、底物，按規(guī)定時間反應，最后加入終止液終止反應，并立即用酶標儀檢測信號。
OFQ試劑盒 技術具備操作簡便、靈敏度高、特異性強、重復性好等優(yōu)勢。在基礎神經科學研究中，有助于深入探究 OFQ 在正常生理狀態(tài)下的神經調節(jié)機制以及在疾病發(fā)生發(fā)展過程中的病理生理變化。在臨床應用方面，可輔助多種疾病的診斷、病情監(jiān)測及預后評估，例如在慢性疼痛綜合征、抑郁癥、焦慮癥、心血管疾病以及某些內分泌紊亂疾病的研究中，通過檢測 OFQ 含量變化，能為疾病的診療方案制定提供重要依據(jù) 。