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樣本采集與處理：依據(jù)實驗需求，收集適量樣本。若是血清，需讓血液自然凝固后離心獲??；血漿則要在采血時添加合適抗凝劑再離心分離；細胞裂解液需按照規(guī)范流程裂解細胞并離心去除細胞碎片等雜質(zhì)。收集處理好的樣本妥善保存，防止反復(fù)凍融。
試劑盒準備：從冰箱取出試劑盒，室溫（20℃ - 25℃）平衡 30 分鐘，確保試劑盒內(nèi)各試劑溫度一致。同時準備好移液器、吸頭、酶標(biāo)儀等實驗器材，并檢查其性能是否正常。
加樣：將標(biāo)準品、待測樣本及空白對照按規(guī)定體積準確加入微孔板相應(yīng)孔中，輕輕振蕩混勻，使樣本與包被抗體充分接觸，然后在設(shè)定溫度下孵育特定時長。
洗板：孵育結(jié)束，棄去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌微孔板 3 - 5 次，徹di清除未結(jié)合的物質(zhì)，降低非特異性信號干擾。每次洗滌后需將微孔板拍干，避免殘留液體影響后續(xù)反應(yīng)。
加酶標(biāo)抗體：向各孔加入適量酶標(biāo)檢測抗體，振蕩混勻后再次孵育。
顯色與終止：加入底物顯色液，在避光條件下孵育，待顏色變化至合適程度時，加入終止液終止反應(yīng)，使反應(yīng)停止在最佳檢測狀態(tài)。
結(jié)果測定：立即使用酶標(biāo)儀在規(guī)定波長下測定各孔 OD 值，根據(jù)標(biāo)準曲線計算出樣本中 NF-κB 的含量。
高靈敏度：能夠精準檢測到極低濃度的 NF-κB，滿足對微量樣本或低表達水平的檢測需求。
特異性強：試劑盒中的抗體對 NF-κB 具有高度特異性，與其他類似物質(zhì)交叉反應(yīng)極小，保證檢測結(jié)果的準確性。
重復(fù)性好：同一批樣本多次檢測結(jié)果穩(wěn)定，變異系數(shù)小，為科研及臨床診斷提供可靠且可重復(fù)的數(shù)據(jù)支持。在應(yīng)用方面，NF-κB試劑盒可用于研究炎癥性疾病的發(fā)病機制、評估腫瘤的發(fā)展進程等，為醫(yī)學(xué)研究和臨床實踐提供有力的數(shù)據(jù)支撐。