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淺析生物磁珠分離技術(shù)原理
生物磁珠分離技術(shù)借助生物磁珠捕獲樣品中靶物質(zhì)，通過生物磁珠在磁場中的運(yùn)動(dòng)使靶物質(zhì)(如病原微生物)分離。生物磁珠由磁性載體和免疫配基結(jié)合而成。天然磁性材料可從磁性細(xì)菌中分離獲得，如從磁性細(xì)菌體內(nèi)提取納米生物磁珠，在其表面聯(lián)上大腸桿菌抗體后用于分離大腸桿菌，但該方法成本較高，因而多采用工業(yè)方法制備。1979年，研發(fā)出了能生產(chǎn)直徑1.5～100?m、結(jié)構(gòu)對稱的多聚體超順磁性微球(簡稱“磁珠”)的技術(shù)。該技術(shù)生產(chǎn)的磁珠僅在磁場中表現(xiàn)出磁性，因此向樣品中加入磁珠時(shí)，磁珠分散并能與樣品充分混合；當(dāng)在試管一側(cè)添加強(qiáng)磁場時(shí)，生物磁珠能迅速發(fā)生力學(xué)遷移并吸附在靠近磁場的試管內(nèi)壁，移除樣品后即可將磁珠分離。
免疫配基包被于磁珠外表面，主要包括一抗、二抗和蛋白質(zhì)A/G。包被一抗的生物磁珠可直接使用，方便快捷，但僅適用于特定靶物質(zhì)的分離；包被二抗或蛋白質(zhì)的生物磁珠必須再包被一抗才能捕獲相應(yīng)靶物質(zhì)，但其能與多種相應(yīng)的一抗結(jié)合，靈活性強(qiáng)。
生物磁珠表面的特異抗體能與樣品中的靶物質(zhì)(具有相應(yīng)的表面抗原)發(fā)生免疫反應(yīng)，形成生物磁珠—靶物質(zhì)復(fù)合物。在外加磁場中，生物磁珠 一靶物質(zhì)復(fù)合物被吸附并滯留在磁場中，而無相應(yīng)表面抗原的物質(zhì)由于不能與生物磁珠表面的特異抗體結(jié)合，沒有磁性，不能在磁場中停留，從而可分離靶物質(zhì)。