菌落總數(shù)即為食品檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間等）培養(yǎng)后，所得每g（mL）檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)。菌落總數(shù)主要作為判定食品被污染程度的標(biāo)志，也可以應(yīng)用這一方法觀察細(xì)菌在食...

分離純化處于重組蛋白表達(dá)的下游處理（downstreamprocessing）階段，且與上游過(guò)程緊密相聯(lián)，如是否帶有親和標(biāo)簽，是否進(jìn)行分泌表達(dá)等。所以在對(duì)目的蛋白表達(dá)純化時(shí)，要統(tǒng)一考慮和整體設(shè)計(jì)，并充...

包涵體復(fù)性注意事項(xiàng)1)zui適pH值范圍為8.0-9.0之間；2)溫度適宜選擇4℃；3)復(fù)性過(guò)程蛋白濃度不宜過(guò)大，一般為0.1-0.2mg/mL；4)復(fù)性時(shí)間一般為24-36小時(shí)；5)低分子化合物如L...

1、外源DNA片段成功插到載體里面（PCR鑒定），但無(wú)法表達(dá)蛋白一般判斷目的基因是否表達(dá)，首先要進(jìn)行SDS-PAGE檢測(cè)。跑膠的時(shí)候一定要設(shè)對(duì)照：Marker，標(biāo)準(zhǔn)品陽(yáng)性對(duì)照，以及空白載體(誘導(dǎo))和重...

1:通過(guò)His標(biāo)簽純化的蛋白，雜帶比較多，如何改進(jìn)？（1）如果純化的是上清，蛋白酶會(huì)部分降解目的蛋白，可通過(guò)加多種入蛋白酶抑制劑改進(jìn)。（2）可提高雜蛋白與鎳柱結(jié)合起始咪唑濃度，以降低雜蛋白與鎳柱的親和...

固定化金屬離子親合層析(Immobilizedmetalionaffinitychromatography,IMAC)，簡(jiǎn)稱金屬螯合親合層析，是一種新型的應(yīng)用于原核蛋白純化的技術(shù)。該方法通過(guò)蛋白質(zhì)表面...

蛋白質(zhì)在分子生物學(xué)中的分類，大體上可分為天然蛋白和重組蛋白。提取天然蛋白和構(gòu)建重組蛋白都需要先確定生物原材料，如植物材料主要以植物的葉，胚，果實(shí)和根莖等為主；動(dòng)物通常是選用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的器官和組織；而微生...

基本原理凝膠過(guò)濾色譜蛋白純化法，又稱為空間排阻色譜，分子篩等。其原理是應(yīng)用蛋白質(zhì)分子量或分子形狀的差異來(lái)分離。當(dāng)樣品從色譜柱的頂端向下運(yùn)動(dòng)時(shí)，大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入凝膠顆粒從而被迅速洗脫；而較小的蛋白...

WesternBlot原理WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測(cè)物是蛋白質(zhì)，“探針”是抗體，“顯色”用標(biāo)記的二抗。SDS-PAGE可對(duì)蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行分離，轉(zhuǎn)移到固相載體——例如硝酸纖...

一、分離純化的基本原理研究基因的表達(dá)和調(diào)控時(shí)常常要從組織和細(xì)胞中分離和純化RNA。RNA質(zhì)量的高低常常影響cDNA庫(kù)，RT-PCR和NorthernBlot等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的成敗。Trizol是一種新...