體液氧化應激活性氧魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑盒說明書

主要用途

      體液氧化應激活性氧（ROS）魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑是一種旨在通過自由基探針魯米諾和強化劑的參與下，體液樣品中的活性氧族使發(fā)光物氧化降解并發(fā)光，在化學發(fā)光儀（Luminometer）的幫助下定量檢測樣品中活性氧族（過氧化氫）的生成和數(shù)量的經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種體液包括尿液、腦脊液、唾液、精液、羊水等各種體液的活性氧族的檢測。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡易，性能穩(wěn)定，檢測敏感。

產(chǎn)品內(nèi)容

清理液（Reagent A）      毫升

強化液（Reagent B）      毫升

發(fā)光液（Reagent C）      毫升

產(chǎn)品說明書 1份

保存方式

保存強化液（Reagent B）和發(fā)光液（Reagent C）在－20℃冰箱里，嚴格避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月

用戶自備

15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器

臺式離心機：用于去除樣品雜質(zhì)

測試管：用于發(fā)光檢測用的試管

化學發(fā)光儀：用于檢測化學發(fā)光

實驗步驟

• 樣品預處理
• 準備好1.5毫升離心管
• 移取1毫升液體到離心管 
• 放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘，速度為700g（或3000RPM，例如eppendorf 5415）
• 小心移取上清液到新的1.5毫升離心管
• （選擇步驟）放進－70℃冰箱里保存
• 放進37℃培養(yǎng)箱里備用（1小時內(nèi)）
• 測讀

    測讀開始前，打開化學發(fā)光儀，設定儀器內(nèi)溫度為37℃預熱和整合測讀10秒或 15分鐘；然后關掉實驗室的燈光。將－20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化，嚴格置于暗室里。然后進行下列操作。

• 準備好測試管，做好標記：陰性對照、樣品本底和樣品活性
• 移取xx微升清理液（Reagent A）到陰性對照測試管
• 移取400微升上述預處理的待測體液到樣品本底測試管
• 移取400微升上述預處理的待測體液到樣品活性測試管
• 分別加入xx微升強化液（Reagent B）到上述測試管，除樣品本底測試管外
• 分別加入xx微升發(fā)光液（Reagent C）到上述測試管，除樣品本底測試管外
• 輕輕渦旋混勻
• 即刻放進37℃化學發(fā)光儀里測讀
• 整合測讀10秒，獲得相對發(fā)光單位（relative light unit；RLU）
• 或者整合測讀15分鐘，獲得光電子讀數(shù)：
• 計算ROS水平：

 注意事項

• 本產(chǎn)品為50次操作
• 如果測定體系變化，則試劑用量相應變化
• 操作時，須戴手套
• 測試前，體液須新鮮收集，1小時內(nèi)比較佳
• 樣品制備后即刻測讀，不宜過夜保存
• 必要時，例如活性氧族過低，可以濃縮樣品處理
• 測讀的所有步驟均須在暗室里進行
• 如果是注射式化學發(fā)光儀，建議測試前后使用無離子水沖洗化學發(fā)光儀注射（injector）管道
• 本公司提供系列活性氧分析試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標準

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感