螺旋體(spirochaeta)是一類細(xì)長、彎曲呈螺旋狀、運動活潑的原核細(xì)胞型微生物，具有細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)，細(xì)胞壁有脂多糖和壁酸，螺旋體分為密螺旋體(如梅毒螺旋體)、疏螺旋體(如回歸熱螺旋體)、鉤端螺旋體等；梅毒螺旋體有 8～12均勻的螺旋，兩端尖直；鉤端螺旋體細(xì)長，數(shù)目較多而且細(xì)密，一端或兩端彎曲呈鉤狀，菌體亦常屈曲呈C形或S形。梅毒螺旋體和鉤端螺旋體可用鍍銀法進(jìn)行顯色，如 Levaditi 法、Warthin-Starry 法。

螺旋體染色液(Levaditi 銀法)是利用螺旋體具有的嗜銀性，在一定條件下螺旋體可從銀液中吸附銀離子，經(jīng)還原液處理后，螺旋體內(nèi)吸附的銀離子被還原為黑色的金屬銀而顯色，主要用于顯示梅毒螺旋體，亦可顯示鉤端螺旋體，但較少顯示熱回歸螺旋體，對肝臟梅毒樹膠腫和肝臟鉤端螺旋體具有鑒別作用。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考)：

1、組織切片厚度1～2mm 為佳，置于10%福爾馬林中固定2～4天。

2、流水沖洗過夜。

3、95%乙醇浸泡24h，蒸餾水浸洗并不停搖動，直至組織下沉為止。

4、更換新的蒸餾水浸洗 10min。

5、入銀溶液加蓋置于37℃恒溫箱孵育1天，更換新的銀溶液，繼續(xù) 37℃恒溫箱孵育2 天。

6、蒸餾水浸洗3次，每次10min。

產(chǎn)品組成：

名稱		規(guī)格 3×50ml	Storage
試劑(A):銀溶液		2×50ml	RT 避光
試劑 (B): Levaditi 還原液	B1: Levaditi 還原液 A	25ml	RT 避光
	B2: Levaditi 還原液 B	25ml	RT
臨用前，按 B1:B2=1:1 混合，即為 Levaditi 還原液，即配即用。
使用說明書		1 份

7、入配制好的 Levaditi 還原液，加蓋室溫避光孵育2天。

8、蒸餾水浸洗3次，每次 2min。

9、常規(guī)脫水透明，浸蠟包埋。

10、切片厚度6～8μm，貼片，烤干。

11、二甲苯或脫蠟透明液脫蠟 2 次，中性樹膠封固。

染色結(jié)果：

梅毒螺旋體、鉤端螺旋體	黑色或棕黑色
背景	淡黃至棕黃色

注意事項：

1、實驗所用器皿需用硫酸洗液浸泡，洗干凈。

2、步驟4、5的洗片步驟很有必要，一定要把組織中的甲醛和乙醇充分清除，否則易導(dǎo)致組織內(nèi)銀鹽的沉淀。

3、某些細(xì)菌和真菌菌絲也會被該染液染成黑色，應(yīng)注意螺線體為螺旋狀形態(tài)，并加以鑒別。

4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

5、試劑開封后請盡快使用，以防影響后續(xù)實驗效果。

有效期：12個月有效。

螺旋體染色液(Levaditi銀法)說明書

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