貼壁細胞標準換液步驟

貼壁細胞標準換液步驟

一、準備工作
1.  廢液缸
2.  吸管
3.  新鮮培養(yǎng)基
4.  油性記號筆/普通簽字筆
5.  實驗記錄本

二、實驗步驟
1.  打開層流，打開層流間和超凈臺的紫外線燈，廢液缸和吸管同時照射；
2.  把水浴鍋調(diào)整到37℃ 并使其穩(wěn)定；
3.  將新鮮培養(yǎng)基放置到水浴鍋中，注意防止水面高于瓶肩，100ml液體保持10分鐘，（200ml液體保持15分鐘，500ml液體保持20分鐘），間或搖動；
4.  著無菌服裝，帽子，口罩和手套
5.  用75%乙醇消毒培養(yǎng)基瓶外壁，放置到超凈臺上；
6.  將細胞培養(yǎng)瓶取出，用75%乙醇棉球消毒瓶底；
7.  用吸管吸棄舊培養(yǎng)基，更換吸管，于非細胞培養(yǎng)面加入新鮮培養(yǎng)基；
8.  記錄實驗過程和細胞培養(yǎng)瓶號。