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小RNA克隆試劑盒產(chǎn)品及特點(diǎn)
克隆是分析低分子RNA的有效方法之一。由于低分子RNA不具有PolyA tail，
需在低分子RNA的5’端和3’端分別加上RNA接頭或者RNA/DNA雜合形式的接
頭，經(jīng)RT-PCR后便可以進(jìn)行克隆。小RNA克隆試劑盒是根據(jù)以上原理開(kāi)發(fā)的，其
流程圖如下：
對(duì)低分子RNA進(jìn)行cDNA擴(kuò)增的試劑盒，經(jīng)本試劑盒擴(kuò)增的cDNA可以用于各種
載體的克隆。擴(kuò)增得到的cDNA可以直接用于TA克隆，或者利用接頭中帶有的酶切
位點(diǎn)進(jìn)行克隆。
備注
使用本試劑盒對(duì)小RNA進(jìn)行克隆時(shí)的操作流程見(jiàn)圖，詳細(xì)步驟如下：
1. 將小RNA進(jìn)行BAP處理，5’端去磷酸化。
2. BAP處理后的小RNA的3’端與生物素化的RNA/DNA接頭連接。
3. 用標(biāo)記Strepto avidin的磁珠，回收帶有生物素的RNA/DNA接頭的Small
RNA，然后進(jìn)行5’端磷酸化反應(yīng)。
4. 將5’端連接上RNA/DNA嵌合的接頭后，使用RT Primer和M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶
進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
5. 從磁珠上回收合成的cDNA后，進(jìn)行PCR反應(yīng)。
6. PCR片段經(jīng)限制酶酶切后，回收、克隆。120101-2    谷胱甘肽瓊脂糖    2mL    490    7-29
120201-25    超敏化學(xué)發(fā)光 (HRP) 檢測(cè)試劑盒（ECL）    25mL    190    7-106
120201-250    超敏化學(xué)發(fā)光 (HRP) 檢測(cè)試劑盒（ECL）    250mL    1090    7-106
120202-100    血液保存和 DNA 純化套裝    100 次    990    2-24
120307-1000    SP6 RNA 聚合酶    1000U    207    10-33
120307-5000    SP6 RNA 聚合酶    5000U    997    10-33
120308-15    植物葉綠體純化試劑盒    15 次    890    8-22
120309-1000    T3 RNA 聚合酶    1000U    150    10-35
120309-10000    T3 RNA 聚合酶    10000U    1290    10-35
120310-1000    T7 RNA 聚合酶    1000U    128    10-34
120310-25000    T7 RNA 聚合酶    25000U    2298    10-34
120312-2500    末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶 (TdT)    2500U    1598    10-29
120312-500    末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶 (TdT)    500U    398    10-29
120401-100    熱啟動(dòng) Taq DNA 聚合酶    100U    157    10-3
120402-1    PCR LIC 克隆套裝    1μg    990    6-17
120403-300    蝦堿性磷酸酶    300U    597    10-54