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新加坡石斑魚虹彩病毒PCR試劑盒

Singapore Grouper Iridovirus(SGIV)

產(chǎn)品及特點

新加坡石斑魚虹彩病毒(Singapore Grouper Iridovirus，SGIV)是一種 DNA 病毒，感染后主要是會造成造血織組壞死，傳染方式主要是以水平感染為 主，該病的外觀臨床癥狀一般包括：體表無明顯損傷，嗜睡，游泳異常；貧血 癥狀明顯，血液稀薄、色淡，凝固性差，鰓外觀呈暗灰色；腎臟失血，呈灰白 色等。但病魚的臨床癥狀也存在一定的差異，該病毒的感染對養(yǎng)魚業(yè)造成嚴(yán)重 損害，因此新加坡石斑魚虹彩病毒的快速準(zhǔn)確鑒定對該病的預(yù)防和檢疫有著重 要作用。本產(chǎn)品就是基于 PCR 技術(shù)的快速診斷產(chǎn)品，它具有下列特點： 

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增新加坡石斑魚虹彩病毒，與其他病 毒沒有交叉反應(yīng)。 

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

新加坡石斑魚虹彩病毒PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設(shè)置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用 10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴(kuò)增，否則實 驗無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。