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當(dāng)前位置:上海信裕生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR-染料法>> 50次桃拉綜合癥病毒RT-PCR試劑盒

桃拉綜合癥病毒RT-PCR試劑盒

參   考   價: 1990 1790

訂  貨  量: 1-4  件 ≥5  件

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號50次

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時間:2020-08-13 16:40:53瀏覽次數(shù):522次

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供貨周期 一周 規(guī)格 50T
貨號 XY-0708 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
主要用途 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。
桃拉綜合癥病毒RT-PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒,根據(jù)其理化性質(zhì)分 α、β、γ、未分類皰疹病毒四個亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛,可感染人類和其他脊椎動物。在自然界廣泛存在,主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織,例如:皮膚、粘膜和神經(jīng)組織。

桃拉綜合癥病毒RT-PCR試劑盒

Taura Syndrome Virus(TSV)

產(chǎn)品及特點

桃拉綜合癥病毒(Taura Syndrome Virus, TSV)會引起桃拉綜合征病毒病, 病蝦不吃食或少量吃食,在水面緩慢游動,在特急性到急性期,幼蝦身體虛弱, 外殼柔軟,消化道空無食物,在附足上會有紅色的色素沉著,尤其是尾足、尾節(jié)、 腹肢,有時整個蝦體體表都變成紅色。較大規(guī)格的病蝦步足末端有蛀斷、潰瘍現(xiàn) 象,兩根觸須、尾扇、胃腸道均變紅,胃腸道腫脹(腸內(nèi)有少量食物),肝胰臟 腫大,變白。該病毒主要感染南美白對蝦,主要發(fā)生在蝦的蛻皮期,我國由于引 進南美白對蝦并進行了規(guī)模養(yǎng)殖,該病在南美白對蝦養(yǎng)殖密集區(qū)中已有發(fā)現(xiàn),因 此桃拉綜合癥病毒的快速準(zhǔn)確鑒定對該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用。。為此本 公司開發(fā)了本產(chǎn)品,可用于在科研領(lǐng)域快速定量檢測桃拉綜合癥病毒。它具有下 列特點:

1. 一站式,用于不需要單獨準(zhǔn)備每種成分,包括引物和對照。

2. 根據(jù)桃拉綜合癥病毒的保守基因序列設(shè)計的引物,具有良好的特異性。

3. 靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應(yīng)。

4. 使用一管式 RT-PCR 技術(shù),RT 和 PCR 兩步在一個試管內(nèi)完成,不需要中間 轉(zhuǎn)移樣品,降低了操作誤差和可能的污染。

5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的 RT-PCR。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研,不能用于臨床。

桃拉綜合癥病毒RT-PCR試劑盒規(guī)格及成分

編號

成  份

規(guī)格

試劑一

5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

200 μL(橘黃蓋)

試劑二

MMLV-Taq Mix

75 μL(紅蓋)

試劑三

超純水 

1 mL(亮黃蓋)

試劑四

桃拉綜合癥病毒 RT-PCR 引物 混合液 

100 μL(白蓋)

試劑五

桃拉綜合癥病毒 RT-PCR 陽性 對照(1×10E8 拷貝/μL) 

50 μL(黃蓋)

試劑六 天凈沙核酸釋放劑(試用裝) 20 次(1mL,綠蓋)
試劑七

使用手冊 

1 份

運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為 12 個月。收到貨后陽性對照需要跟其他成分 分開放置,因為其容易污染其他成分,造成假陽性。 

自備試劑 樣品 RNA

使用方法 一、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品,必須設(shè)置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽性 對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?10μL 流行性出血熱病毒 PCR 陽性對照的 100 倍稀釋作為制備的陽性對照;用水作為制備的陰性對照。 制備所得成為樣品 RNA。

2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 RNA 提 取試劑盒兼容。

二、設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系)

3. 如果有 N+2 個樣品,則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管(額外增加的兩個管一個是 RT-PCR 陽性對照,另一個是 RT-PCR 陰性對照)并按照下表在 PCR 管中 加入下列成分:

成分

樣品

陽性對照

陰性對照

5×雙酶一管式 RT-PCR Buffer

各 4 μL

4 μL

4 μL

桃拉綜合癥病毒 RT-PCR 引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2 個制備的 RNA 樣品

各12.5 μL

 

 

超純水 

 

12.5 μL

 

桃拉綜合癥病毒 RT-PCR 陽性對照 的 100 倍稀釋液

 L

 

12.5 μL

 MMLV-Taq Mix 1.5 μL  1.5 μL 1.5 μL

4. 上機進行 RT-PCR,RT-PCR 反應(yīng)參數(shù)為:

過程

溫度

時間

逆轉(zhuǎn)錄 

42℃

30 min

預(yù)變性

95℃  

5 min

PCR 反應(yīng) (35 個循環(huán))

95℃ 

30 sec

58℃ 

30 sec

72

30 sec

 延伸  72 7 min

5. 瓊脂糖電泳檢測擴增效果。如果陰性對照有擴增產(chǎn)物或陽性對照無擴增產(chǎn)物, 則說明實驗失敗,需要分析實驗失敗的原因。只有在陰性對照沒有擴增產(chǎn)物、 陽性對照必須有 231bp 的條帶出現(xiàn),才有必要分析樣品的實驗結(jié)果,如果有 預(yù)期片段大小的擴增產(chǎn)物則為陽性,如果無則為陰性。

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