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ScreenFect™ A plus

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更新時(shí)間:2025-01-14 17:17:21瀏覽次數(shù):692

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 一個(gè)月以上 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥
ScreenFect™ A plus
ScreenFect ™A plus(也稱作ScreenFect ™A+)是通過點(diǎn)擊化學(xué)(Click Chemistry)篩選※1出的新型陽離子脂質(zhì)體組成的轉(zhuǎn)染試劑,適用于各種真核生物來源的細(xì)胞,也可直接添加至含有抗生素或者血清的培養(yǎng)基中。

詳細(xì)介紹

ScreenFect A+ScreenFect™ A plus

DNA & siRNA 轉(zhuǎn)染試劑



通過點(diǎn)擊化學(xué)開發(fā)的新型脂質(zhì)體!!

ScreenFect ™A plus(也稱作ScreenFect ™A+)是通過點(diǎn)擊化學(xué)(Click Chemistry)篩選※1出的新型陽離子脂質(zhì)體組成的轉(zhuǎn)染試劑,適用于各種真核生物來源的細(xì)胞,也可直接添加至含有抗生素或者血清的培養(yǎng)基中。

使用 ScreenFect ™A plus轉(zhuǎn)染試劑可將DNA和siRNA導(dǎo)入通用實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系(HeLa、HepG2、MDCK等)、干細(xì)胞(小鼠ES細(xì)胞等)、血細(xì)胞(巨噬細(xì)胞、THP-1、RAW264.7等)、小膠質(zhì)細(xì)胞、原代細(xì)胞(原代培養(yǎng))和昆蟲細(xì)胞中。其細(xì)胞毒性低,因此轉(zhuǎn)染后無需更換培養(yǎng)基。另外,試劑成分中不含有任何有毒有害物質(zhì)。

※1 Biomaterials. 2012 Nov; 33(32):8160-6. 2012



特點(diǎn)


● DNA和ScreenFect ™A plus試劑混合比例可選范圍更廣

使用一步法縮短分析時(shí)間至1天

可高效轉(zhuǎn)染難以導(dǎo)入的細(xì)胞

成本低



ScreenFect ™A plus 轉(zhuǎn)染性能


ScreenFect™ A plus

ScreenFect™ A plus



ScreenFect™ A plus


※ MCF-7:人乳腺癌來源細(xì)胞(上皮細(xì)胞樣形態(tài))(貼壁系)

※ 導(dǎo)入方法:A公司新產(chǎn)品2步法,ScreenFect ™A plus1步法


改善難以導(dǎo)入的細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率!



ScreenFect™ A plus


ScreenFect™ A plus



ScreenFect™ A plus


※ MDCK:狗腎小管上皮細(xì)胞來源(貼壁系)

※ 導(dǎo)入方法:A公司新產(chǎn)品2步法,ScreenFect ™A plus1步法


改善難以導(dǎo)入的細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率!



ScreenFect™ A plus


ScreenFect™ A plus



ScreenFect™ A plus


※ K562:人慢性髓性細(xì)胞白血病細(xì)胞來源(懸浮系)

※ 導(dǎo)入方法:A公司新產(chǎn)品2步法ScreenFect ™A plus1步法


改善難以導(dǎo)入的細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率!




◆應(yīng)用數(shù)據(jù)


1. 向LNCaP細(xì)胞(貼壁系)中導(dǎo)入YFP融合基因的實(shí)驗(yàn)


進(jìn)行向LNCaP細(xì)胞(貼壁系)中導(dǎo)入YFP融合基因的實(shí)驗(yàn),在熒光顯微鏡下比較導(dǎo)入基因的表達(dá)效率。

使用ScreenFect ™A plus和增強(qiáng)劑SFA P-reagent,可以觀察到與其他公司產(chǎn)品相同或更高的表達(dá)效率。

※ 數(shù)據(jù)刊登于BioWindow No144 (2016年6月號)


LNCap (人前列腺癌) 中的性能比較

ScreenFect™ A plus


ScreenFect™ A plus


〔接種細(xì)胞數(shù)〕3×105 cells/well

〔質(zhì)粒DNA量〕1 µg/assay

〔轉(zhuǎn)染試劑混合比例〕

 pDNA量 (µg) : ScreenFect ™A plus reagent (µL) = 1 : 3

〔孔板〕24孔板

〔接種細(xì)胞數(shù)〕1.5×105 cells/well

〔質(zhì)粒DNA量〕1 µg/assay

〔轉(zhuǎn)染試劑混合比例〕

 pDNA量 (µg) : ScreenFect ™A plus reagent (µL) = 1 : 3

〔孔板〕24孔板




















2. 向HeLa細(xì)胞(貼壁系)中導(dǎo)入EGFP_mRNA的實(shí)驗(yàn)


進(jìn)行向HeLa細(xì)胞(貼壁系)中導(dǎo)入EGFP_mRNA的實(shí)驗(yàn),在熒光顯微鏡下比較EGFP的表達(dá)效率。

使用ScreenFect ™A plus和增強(qiáng)劑SFA P試劑(產(chǎn)品編號:191-18331、197-18333),可以觀察到與其他公司產(chǎn)品相同或更高的表達(dá)效率。

※ 數(shù)據(jù)刊登于BioWindow No144 (2016年6月號)


HeLa細(xì)胞中的mRNA轉(zhuǎn)染性能比較

ScreenFect™ A plus

〔接種細(xì)胞數(shù)〕0.7 x 105 cells/well

〔mRNA量〕0.1 µg/assay

〔轉(zhuǎn)染試劑混合比例〕mRNA量 (µg) : ScreenFect ™ A plus 試劑(µL) = 1 : 4

〔檢測時(shí)間〕轉(zhuǎn)染后48 h

〔曝光時(shí)間〕2 s



3. 向hiPSC(201B7株)中導(dǎo)入GFP融合基因的實(shí)驗(yàn)


進(jìn)行將hiPSC(201B7株) 通過反向轉(zhuǎn)染(1-STEP)導(dǎo)入GFP融合基因的實(shí)驗(yàn),在熒光顯微鏡以及流式細(xì)胞儀下比較導(dǎo)入基因的表達(dá)效率。

使用反向轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染hiPS細(xì)胞的效果優(yōu)異,在StemSure® hPSC培養(yǎng)基Δ和mTeSR™ 1兩個(gè)培養(yǎng)基中,ScreenFect ™A plus表現(xiàn)出與其他公司產(chǎn)品相同或更高的導(dǎo)入效率。

※ 數(shù)據(jù)刊登于BioWindow No144 (2016年6月號)


hiPSC201B7)中的性能比較

1-step   使用StemSure® hPSC培養(yǎng)基Δ

ScreenFect™ A plus


ScreenFect™ A plus


ScreenFect™A plus的轉(zhuǎn)染條件

〔細(xì)胞數(shù)〕5×105 cells/well

〔質(zhì)粒DNA量〕4 µg/assay

〔轉(zhuǎn)染試劑混合比例〕

 pDNA量 (µg) : ScreenFect ™A plus reagent (µL) = 1 : 0.5

〔孔板〕12孔板

〔備注〕SFA plus reagent以及pDNA使用了Opti-MEM® 進(jìn)行稀釋。

其他公司產(chǎn)品的轉(zhuǎn)染條件

〔細(xì)胞數(shù)〕5×105 cells/well

〔質(zhì)粒DNA量〕2 µg/assay

〔轉(zhuǎn)染試劑混合比例〕

 pDNA量 (µg) : ScreenFect ™A plus reagent (µL) = 1 : 2

〔孔板〕12孔板




   

1-step   使用mTeSR™1培養(yǎng)基

ScreenFect™ A plus


ScreenFect™ A plus

ScreenFect™A plus和其他公司產(chǎn)品的轉(zhuǎn)染條件

〔細(xì)胞數(shù)〕5×105 cells/well

〔質(zhì)粒DNA量〕1 µg/assay

〔轉(zhuǎn)染試劑混合比例〕

 pDNA量 (µg) : ScreenFect ™A plus reagent (µL) = 1 : 2

〔孔板〕12孔板

〔備注〕SFA plus reagent以及pDNA使用了Opti-MEM® 進(jìn)行稀釋。


































4. HeLa細(xì)胞(貼壁系)中導(dǎo)入PIK3CB siRNA的實(shí)驗(yàn)


使用反向轉(zhuǎn)染(1-STEP)法以及正向轉(zhuǎn)染(2-STEP)法進(jìn)行向HeLa細(xì)胞中導(dǎo)入PIK3CB siRNA的實(shí)驗(yàn),通過實(shí)時(shí)定量PCR測量PIK3CB mRNA的表達(dá)水平。

在定量結(jié)果的基礎(chǔ)上與其他公司產(chǎn)品比較敲降效率,結(jié)果顯示ScreenFect ™A plus表現(xiàn)出與其他公司產(chǎn)品相同或更高的敲降效率。

※ 數(shù)據(jù)刊登于BioWindow No149 (2017年3月號)


HeLa細(xì)胞中的性能比較


ScreenFect™ A plus

ScreenFect™ A plus

〔接種細(xì)胞數(shù)〕1×105 cells/well

〔siRNA〕5 pmol/assay

〔轉(zhuǎn)染試劑混合比例〕ScreenFect ™A plus reagent = 0.5~1.5 µL

 其他公司產(chǎn)品 = 1.5 μL

〔孔板〕24孔板

〔檢測時(shí)間〕48 h后進(jìn)行確認(rèn)

〔接種細(xì)胞數(shù)〕0.5×105 cells/well

〔siRNA〕5 pmol/assay

〔轉(zhuǎn)染試劑混合比例〕ScreenFect ™A plus reagent = 0.5~1.5 µL

 其他公司產(chǎn)品 = 1.5 μL

〔孔板〕24孔板

〔檢測時(shí)間〕48 h后進(jìn)行確認(rèn)


   




























使用方法、擁有使用實(shí)績的細(xì)胞


1-Step與2-Step 操作比較


產(chǎn)品

ScreenFect™A plus

A公司新產(chǎn)品(+reagent)

A公司的新產(chǎn)品

各條件

1-Step

2-Step

實(shí)驗(yàn)方案天數(shù)

2 Days

3 Days

DNA量

是否需要調(diào)整細(xì)胞數(shù)

可隨時(shí)調(diào)整

取決于預(yù)培養(yǎng)條件

是否需要胰-蛋白酶處理

轉(zhuǎn)染時(shí)

預(yù)培養(yǎng)時(shí)

基于HTS細(xì)胞檢測的可操作性

+++++

+

是否需要更換培養(yǎng)基

取決于細(xì)胞










ScreenFect ™A plus一步法概要


ScreenFect™ A plus


1步法 → 從轉(zhuǎn)染到本分析的時(shí)間可縮短24 h!



ScreenFect ™A plus 轉(zhuǎn)染條件


DNA轉(zhuǎn)染


DNA 轉(zhuǎn)染 (/well)

孔板類型

表面積

培養(yǎng)基體積

SF-DNA 復(fù)合物的總體積

DNA

/稀釋buffer

轉(zhuǎn)染試劑

/稀釋buffer

96 wells

0.3 cm2

100 µL

10 µL

50 ng/5 μL

0.15 or 0.2 μL/5 μL

24 wells

2 cm2

500 µL

50 µL

250 ng/25 μL

0.75 or 1.0 μL/25 μL

12 wells

4 cm2

1,000 µL

100 µL

500 ng/50 μL

1.5 or 2.0 μL/50 μL

6 wells

10 cm2

2,000 µL

250 µL

1,250 ng/125 μL

3.75 or 5.0 μL/125 μL









注:進(jìn)行大規(guī)模轉(zhuǎn)染時(shí),請?jiān)谵D(zhuǎn)染前準(zhǔn)備多個(gè)微管,之后再進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

例:10 cm培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)染相當(dāng)于 → 5~6個(gè)樣品(6孔板)


▼ ScreenFect ™A plus 推薦實(shí)驗(yàn)方案

產(chǎn)品隨附的說明書中提供了簡易的實(shí)驗(yàn)方案,請確認(rèn)“相關(guān)資料"中的文件。

ScreenFect™A plus推薦使用1步轉(zhuǎn)染法。在試劑方面,為保證充分的轉(zhuǎn)染效率,推薦質(zhì)粒DNA與轉(zhuǎn)染試劑的混合比例為1 : 3~1 : 4。另外,如希望進(jìn)一步抑制轉(zhuǎn)染時(shí)的細(xì)胞毒性,請使用60~80%匯合度的細(xì)胞。

siRNA轉(zhuǎn)染


siRNA 轉(zhuǎn)染 (/well)

孔板類型

表面積

培養(yǎng)基體積

SF-siRNA 復(fù)合物的總體積

siRNA

/稀釋buffer

轉(zhuǎn)染試劑

/稀釋buffer

96 wells

0.3 cm2

100 µL

10 µL

1 pmol/5 µL

0.1~0.3 µL/5 µL

24 wells

2 cm2

500 µL

50 µL

5 pmol/25 µL

0.5~1.5 µL/25 µL

12 wells

4 cm2

1,000 µL

100 µL

10 pmol/50 µL

1.0~3 µL/50 µL

6 wells

10 cm2

2,000 µL

250 µL

25 pmol/125 µL

2.5~7.5 µL/125 µL










注:雖然ScreenFect ™A plus也可以用于siRNA轉(zhuǎn)染,但更推薦使用ScreenFect ™ siRNA 進(jìn)行siRNA轉(zhuǎn)染。



擁有ScreenFect ™A & A plus 應(yīng)用實(shí)例的細(xì)胞


更多詳細(xì)資料請聯(lián)系富士膠片和光。


No.

細(xì)胞名稱

No.

細(xì)胞名稱

No.

細(xì)胞名稱

No.

細(xì)胞名稱

1

143BTK

22

GP2-293

43

LLC-MK2

64

OLHNI-2

2

786-O

23

H9C2

44

LO2

65

Mouse overy cell

3

A2058

24

HCT116

45

LoVo

66

PC12

4

A375

25

HEK293

46

MC3T3

67

Plat-E

5

A549

26

HEK293 TN

47

MC3T3-E1

68

PLC8024

6

B16

27

HEK293A

48

MCF-10

69

Primary Fibroblast

7

B16F10

28

HEK293F

49

MCF-10A

70

RAW264.7

8

Ba/F3-CH1

29

HEK293FT

50

MCF-7

71

SH-SY5Y

9

BEAS-2B

30

HEK293T

51

MDCK

72

SK-Hep1

10

BEL-7402

31

HeLa

52

MEF

73

SKOV3

11

BT549

32

HeLa S3

53

mES

74

T98G

12

C2C12

33

HEp-2

54

mHSC

75

TE-13

13

Cell line from killifish

來自鳉魚的細(xì)胞系

34

HepG2

55

Microglia 小膠質(zhì)細(xì)胞

76

THP-1

14

CHO-K1

35

hiPSC

56

MLEC

77

U-251 MG

15

COS-7

36

HK2

57

MS-1

78

U2OS

16

DB lymphoma  

DB淋巴瘤

37

HKC

58

Myeloid dendritic cell (MDC)

骨髓樹突狀細(xì)胞

79

U937

17

DC 2.4

38

HL7704

59

NB1RGB

80

Vero

18

Du145

39

HuH-7

60

NCI-H1703

81

Drosophira ovary somatic cell

19

EL4

40

HUVEC

61

NE3

82

HT1080

20

Endothelium cell

內(nèi)皮細(xì)胞

41

Ins-1

62

NIH 3T3

83

RH7777

21

EPC(carp)

42

L428

63

NK92

84

HaCaT


























富士膠片和光將實(shí)時(shí)更新ScreenFect™數(shù)據(jù)庫中的使用實(shí)例,如對上述內(nèi)容有疑問,歡迎隨時(shí)聯(lián)系進(jìn)行咨詢。



◆產(chǎn)品列表


產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱產(chǎn)品規(guī)格
293-73201ScreenFect™ A0.2 mL
299-732031 mL
297-732041 mL×5
293-75901ScreenFect™ mRNA0.2 mL
299-759031 mL
299-75001ScreenFect™ siRNA0.2 mL
295-750031 mL
290-80203ScreenFect™ UP-2931 L用
294-80201100 mL用
191-18331SFA P-reagent100 μL
197-18333500 μL
194-18181ScreenFect™ Dilution Buffer50 mL





【相關(guān)資料】


























一步法和兩步法實(shí)驗(yàn)流程的比較


產(chǎn)品名稱

ScreenFect ™ A plus

A廠家新產(chǎn)品 (+試劑)

A廠家產(chǎn)品

推薦的實(shí)驗(yàn)流程

一步法

兩步法

實(shí)驗(yàn)用時(shí)

2天

3天

所需DNA量

細(xì)胞數(shù)目調(diào)整

靈活
(細(xì)胞準(zhǔn)備僅在轉(zhuǎn)染之前)

不靈活
(取決于細(xì)胞預(yù)培養(yǎng)條件)

胰-酶消化

需要
(僅在轉(zhuǎn)染之前)

需要
(在細(xì)胞預(yù)培養(yǎng)之前)

適于高通量篩選

+++++

+

培養(yǎng)基的更換

取決于細(xì)胞系












ScreenFect™ A plus


一步法比兩步法節(jié)省24小時(shí)!



高性價(jià)比的高性能基因?qū)朐噭?/strong>

ScreenFect 通信

基因?qū)肴?iPS 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)


  介紹使用 ScreenFect ™A plus 將基因?qū)肴薸PS細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果和操作步驟。本文記載了作為 iPS 細(xì)胞支架使用的 Matrigel 孔板包被方法、配制含有 Y-27632 的細(xì)胞懸浮液的操作步驟以及推薦的試劑比例,供您參考。


◆導(dǎo)入人iPS細(xì)胞(201B7株)的轉(zhuǎn)染操作實(shí)例


  在這里,我們將介紹一些使用 StemSure® hPSC 培養(yǎng)基Δ(產(chǎn)品編號:197-17571)的操作實(shí)例。該操作步驟的完整版和使用 mTeSR1 培養(yǎng)基的操作步驟,請與富士膠片和光聯(lián)系獲取。


<轉(zhuǎn)染試劑的配制>


將 2.0 μL 的 ScreenFect ™ A plus reagent、4.0 μg 的質(zhì)粒 DNA 加入到 160 μL 的 Opti-MEM 中制成 DNA-lipid complex。


< Matrigel 包被孔板>


1.  4°C下溶解 Matrigel hESC-Qualified Matrix 。為防止發(fā)生凝固,請避免在室溫下溶解。

2.  用 25 mL 冷卻的 D-MEM/Ham's F-12 稀釋 300μL 的 Matrigel。

3.  稀釋后的 Matrigel 溶液按照 1 mL/well 加入到 12 孔板中。

4.  在室溫下孵育1小時(shí)以上。


<細(xì)胞懸液的配制>


1.  將 StemSure® hPSC 培養(yǎng)基Δ在 2-8℃ 下放置數(shù)小時(shí)或過夜緩慢融解。不要在 37° C下解凍,并在一周內(nèi)使用。

2.  將 bFGF(產(chǎn)品編號:064-05381,068-05384)按照終濃度 35-100ng/mL 添加到融解后的 StemSure® hPSC 培養(yǎng)基△中,配制成完-全培養(yǎng)基(以下稱為 sshPSC 培養(yǎng)基)。

3.  使用前將 sshPSC 培養(yǎng)基恢復(fù)至室溫。不要使用溫水浴。

4.  將 Y-27632 按照終濃度 10 μmol/L 添加到 sshPSC 培養(yǎng)基中(以下稱為 ROCKi+培養(yǎng)基)。

5.  去除 hiPS 細(xì)胞培養(yǎng)孔板中的培養(yǎng)基,用 PBS(-)清洗細(xì)胞一次。

*請?jiān)诩?xì)胞匯片達(dá)到80%且處于對數(shù)增殖期時(shí)進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染。

6.  除去 PBS(-),添加 Stempro Accutase。

7.  在 37°C,5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置5分鐘。

8.  用 1 mL 微量移液槍添加 ROCKi+培養(yǎng)基,將細(xì)胞從培養(yǎng)板上分離并吹散成單細(xì)胞。

9.  轉(zhuǎn)移至 15 mL離心管中。

10. 室溫下 1000 rpm(約170×g)離心3分鐘。

11. 去除上清,用ROCKi+培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。

12. 計(jì)算活細(xì)胞的數(shù)量。

13. 用 ROCKi+培養(yǎng)基將細(xì)胞濃度調(diào)整至 5×105 cells/mL。


<轉(zhuǎn)染>


添加 1 mL 配制好的 DNA-lipid complex 到細(xì)胞懸液中,使用移液器充分混勻,并接種在 12 孔板中。

※要點(diǎn)

接種 24 小時(shí)后請更換培養(yǎng)基。此時(shí)的培養(yǎng)基不需要含有 Y-27632。



◆實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)


  通過反向轉(zhuǎn)染(1-STEP)將 GFP 融合基因?qū)?hiPS 細(xì)胞(201B7株),并通過熒光顯微鏡比較基因的導(dǎo)入效率。


<StemSure® hPSC 培養(yǎng)基Δ的使用>

ScreenFect™ A plus

細(xì)胞數(shù):5×105 cells/well

質(zhì)粒 DNA 量:4 μg/assay

轉(zhuǎn)染試劑混合比例:DNA 量(μg):ScreenFect ™ A plus reagent (μL)=1 : 0.5

容器:12 孔板

備注:用 Opti-MEM 稀釋 ScreenFect ™ A plus reagent 和 DNA。


ScreenFect™ A plus

細(xì)胞數(shù):5 x 105 cells/well

質(zhì)粒 DNA 量:1 μg/assay

轉(zhuǎn)染試劑混合比例:DNA數(shù)量(μg):ScreenFect ™ A plus reagent (μL)=1 : 2

容器:12 孔板

備注:用 Opti-MEM 稀釋 ScreenFect ™ A plus reagent 和 DNA。



◆使用上的注意


● 建議在單細(xì)胞狀態(tài)下進(jìn)行人iPS細(xì)胞的基因?qū)搿?/span>

● 建議基因?qū)霑r(shí)的細(xì)胞數(shù)約為 5×105 cells/well。

● 當(dāng)質(zhì)粒 DNA 量多時(shí),導(dǎo)入基因的表達(dá)量高會引起細(xì)胞死亡。



ScreenFect™ A plus

【請聯(lián)系富士膠片和光獲取PDF】


◆Q&A


Q1. 基因?qū)胄实驮趺崔k?

A1. 通過優(yōu)化DNA量和試劑用量可提高效率。另有優(yōu)化Protocol(日語版/英語版),可聯(lián)系富士膠片和光獲取。此外,使用ScreenFect™和SFA P-reagent(產(chǎn)

A1. 品編號:191-18331)也可提高基因?qū)胄省?/span>


Q2. 如何提高表達(dá)效率?

A2. 使用ScreenFect™和SFA P-reagent(產(chǎn)品編號:191-18331)可提高表達(dá)水平。


Q3. 轉(zhuǎn)染試劑對細(xì)胞毒性強(qiáng)怎么辦?

A3. 使用ScreenFect™和SFA P-reagent(產(chǎn)品編號:191-18331)可降低細(xì)胞毒性。


Q4. 從哪些條件實(shí)驗(yàn)開始比較好?

A4. 可參考各ScreenFect™產(chǎn)品的快速Protocol(日語版/英語版),請聯(lián)系富士膠片和光獲取。


Q5. 轉(zhuǎn)染過程是否需要更換培養(yǎng)基?

A5. 更換培養(yǎng)基不是必須的,但在添加轉(zhuǎn)染試劑前更換新鮮的培養(yǎng)基可提高基因?qū)胄剩纳萍?xì)胞狀態(tài)。


Q6. 培養(yǎng)基中能否含有血清和抗生素?

A6. 根據(jù)細(xì)胞類型、DNA導(dǎo)入量等因素,可能需要更換培養(yǎng)基,以適時(shí)控制培養(yǎng)基含或不含血清/抗生素。請根據(jù)實(shí)驗(yàn)用途進(jìn)行討論。


Q7. 1-Step、2-Step是什么?

A7. 1-Step是一種反向轉(zhuǎn)染方法,即轉(zhuǎn)染前通過在細(xì)胞分離狀態(tài)下添加試劑來導(dǎo)入基因。

A7. 2-Step是一種正向轉(zhuǎn)染法,即提前一天進(jìn)行細(xì)胞的預(yù)培養(yǎng),然后在細(xì)胞上添加轉(zhuǎn)染試劑后導(dǎo)入基因。


Q8. 能否同時(shí)導(dǎo)入多個(gè)基因?

A8. 可以。請準(zhǔn)備多種耐藥性基因,推薦使用pEBMulti 和 pCAG。


Q9. ScreenFect ™A和ScreenFect ™A plus分別適用于哪種情況?

A9. 通常情況下推薦使用基因?qū)胄矢叩腟creenFect ™A plus。但如果其對細(xì)胞毒性強(qiáng)或與ScreenFect™A plus相比無性能差異時(shí),推薦使用細(xì)胞

A1. 毒性低且價(jià)格實(shí)惠的ScreenFect ™A。


Q10. 需要轉(zhuǎn)染siRNA時(shí),推薦使用哪種ScreenFect ™?

A10. 可使用ScreenFect ™ siRNA。視情況,ScreenFect ™A plus也能有效轉(zhuǎn)染siRNA。使用ScreenFect ™siRNA無法達(dá)到預(yù)期結(jié)果時(shí),可考慮

A11. 兩種試劑一同使用。


Q11. 需要轉(zhuǎn)染mRNA時(shí),推薦使用哪種ScreenFect ™?

A11. 可使用ScreenFect ™mRNA。與SFA P-reagent一同使用時(shí),可有效轉(zhuǎn)染mRNA,提高表達(dá)水平。

A11. 此外,ScreenFect ™A plus和SFA P-reagent共同使用的最適場景因細(xì)胞而異,部分情況下兩者共同使用能達(dá)到優(yōu)良效果。單獨(dú)使用

A11. ScreenFect ™mRNA無法達(dá)到預(yù)期結(jié)果時(shí),可考慮上述兩種試劑一同使用。


Q12. SFA P-reagent是什么?

A12. 將質(zhì)粒DNA或mRNA導(dǎo)入各種細(xì)胞時(shí),SFA P-reagent和ScreenFect ™一同使用可提高細(xì)胞導(dǎo)入率和轉(zhuǎn)染分子的表達(dá)水平。此外,已確認(rèn)添加

A11. SFA P-reagent還能顯著降低轉(zhuǎn)染試劑的細(xì)胞毒性。


Q13. 有在哪些細(xì)胞中的應(yīng)用實(shí)例?

A13. 已在通用細(xì)胞系(HeLa、HepG2、MDCK、MCF-7、K562 等)、干細(xì)胞、造血細(xì)胞(巨噬細(xì)胞、THP-1、RAW264.7 等)、小膠質(zhì)細(xì)胞、

A11. 原代細(xì)胞、昆蟲培養(yǎng)細(xì)胞、魚類培養(yǎng)細(xì)胞及其他細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)基因?qū)搿?/span>

A11. 更多詳情可查看優(yōu)化Protocol(日語版/英語版),歡迎聯(lián)系富士膠片和光獲取。


Q14. 是否可提供試用裝?

A14. 歡迎向我們聯(lián)系并填寫表格申請?jiān)囉醚b。


Q15. ScreenFect ™是什么試劑?

A15. ScreenFect ™是一種由新型陽離子脂質(zhì)體構(gòu)成的轉(zhuǎn)染試劑。


Q16. 冷凍存儲會對產(chǎn)品性能有影響嗎?

A16. 請勿使用冷凍后的產(chǎn)品。


Q17. 如何調(diào)整所用的質(zhì)粒DNA?

A17. 推薦使用陰離子交換柱或氯化銫密度梯度離心法純化的質(zhì)粒DNA。


Q18. 血清會影響基因?qū)雴幔?/span>

A18. 血清不會影響本產(chǎn)品的性能,但建議轉(zhuǎn)染時(shí)避免使用EDTA 和硫酸葡聚糖等陰離子抑制劑。此外,轉(zhuǎn)染時(shí)避免使用抗生素也可提高轉(zhuǎn)染效率。



◆參考文獻(xiàn)


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