RiboNAT™ 快速無菌檢測試劑盒

RiboNAT™ 快速無菌檢測試劑盒。
注射用藥的安全性檢測中，多國藥典規(guī)定的無菌檢測法至少需培養(yǎng)14天。然而，某些細(xì)胞治療必須在生產(chǎn)后的幾天內(nèi)輸注給患者，這使得在給藥前完成無菌檢測變得困難，這也導(dǎo)致了對能更快提供結(jié)果的無菌檢測方法的需求日益增長，以提升患者安全性?。

RiboNAT™ 快速無菌檢測試劑盒

在注射用藥的安全性檢測中，多國藥典規(guī)定的無菌檢測法至少需培養(yǎng)14天。然而，某些細(xì)胞治療必須在生產(chǎn)后的幾天內(nèi)輸注給患者，這使得在給藥前完成無菌檢測變得困難，這也導(dǎo)致了對能更快提供結(jié)果的無菌檢測方法的需求日益增長，以提升患者安全性?。

RiboNAT™ 是一款采用核酸擴(kuò)增檢測（NAT）技術(shù)的快速無菌檢測試劑盒，能夠在短短7 小時內(nèi)完成檢測，與傳統(tǒng)方法相比大幅縮短了檢測時間。與傳統(tǒng)NAT檢測只針對微生物的基因組DNA不同，RiboNAT™檢測的是核糖體RNA（rRNA）。由于rRNA在微生物中含量較高，這使檢測更加靈敏。同時，傳統(tǒng)方法容易因死菌殘留DNA或環(huán)境及材料中的污染DNA導(dǎo)致假陽性，而RiboNAT™ 有效減少了這一問題，提高了檢測的準(zhǔn)確性。

◆特點(diǎn)

● 檢測當(dāng)日即可獲取結(jié)果（約7 小時）

● 使用rRNA實(shí)時逆轉(zhuǎn)錄PCR法（RT-rt PCR）檢測，靈敏度（9 CFU/mL）高于gDNA檢測

● 降低死菌和殘留DNA導(dǎo)致的假陽性

● 單次可同時檢測多種細(xì)菌（需氧和厭氧）和真菌

◆實(shí)驗流程

◆檢測試劑盒規(guī)格

◆試劑盒組成

◆靈敏度檢測

圖1. 檢測靈敏度

針對藥典規(guī)定的六種微生物，制備了濃度為9 CFU/mL的微生物懸液。利用RiboNAT™從這些懸液中提取RNA，并檢測核糖體RNA（rRNA）。所有微生物的rRNA均成功檢出，Ct值均低于35。

圖2. 細(xì)胞懸液樣品中的檢測靈敏度

針對藥典規(guī)定的六種微生物，制備了濃度為9 CFU/mL的微生物懸液，并分別與0.25×10⁶ cells/mL的HEK293細(xì)胞混合。利用RiboNAT™從混合懸液中提取RNA，并檢測rRNA。所有微生物的rRNA均成功檢出，Ct值均低于35。

此外，所有6種菌株在以下條件下也均被檢出（數(shù)據(jù)未顯示）：

· 間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）：0.5×10⁶ cells/mL

· T-cell：1.0×10⁶ cells/mL

◆靈敏度更高的檢測法

圖3. 靈敏度更高的檢測方法

針對巴西曲霉（Aspergillus brasiliensis）、產(chǎn)孢梭菌（Clostridium sporogenes）和痤瘡丙酸桿菌（Cutibacterium acnes），制備了濃度為2 CFU的微生物懸液。雖然RiboNAT™常規(guī)操作流程規(guī)定的孵育時間為3 小時，但該實(shí)驗將孵育時間延遲至3-15 小時。孵育結(jié)束后，使用RiboNAT™提取RNA，并檢測rRNA。結(jié)果顯示，包括嚴(yán)格厭氧菌（產(chǎn)孢梭菌）和生長緩慢的細(xì)菌（痤瘡丙酸桿菌）在內(nèi)的三種菌株，在14小時或更長時間孵育后均成功檢出，Ct值均低于35。

◆降低假陽性

RiboNAT™ 包含死菌DNA滅活試劑以及DNase處理步驟，可有效降低樣品中殘留DNA導(dǎo)致的假陽性風(fēng)險。

圖4. 降低假陽性

使用商業(yè)化的無菌PBS作為測試樣品，進(jìn)行細(xì)菌核酸檢測（NAT）。其中一組實(shí)驗（上圖），使用市售試劑盒提取DNA，隨后進(jìn)行細(xì)菌靶向?qū)崟r熒光定量PCR檢測。另一組實(shí)驗（下圖），使用RiboNAT™提取RNA，隨后進(jìn)行實(shí)時逆轉(zhuǎn)錄熒光定量PCR檢測?；贒NA的方法中觀察到六條擴(kuò)增曲線，而使用RiboNAT™未檢測到任何擴(kuò)增信號。

◆產(chǎn)品列表