YT人NK細胞白血病細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

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GPR45： G蛋白偶聯(lián)受體45抗體 CD2 Others Canine 狗 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照)

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IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 標簽) 大鼠神經(jīng)肽Y(NPY)ELISA試劑盒 OPGL  大鼠骨保護素配體 96T

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NYS48： NYS48蛋白抗體 COS-1細胞，SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞 人大腸癌細胞,PA319細胞 CM-R005大鼠氣管平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL

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YT人NK細胞白血病細胞人心房肌細胞培養(yǎng)基 100mL 人D-乳酸(D-LAC)ELISA試劑盒 TRAF1 壞死因子受體相關(guān)因子1抗原 0.5mg

IL-23： 白介素-23抗體 蚊源細胞 人結(jié)腸腺癌細胞，SW620[SW-620]細胞 HCC 94 [HCC941122](子宮鱗癌細胞(高分化))

CD27 Others Human 人 CD27 / TNFRSF7 人細胞裂解液 (陽性對照) 人D二聚體(D2D)ELISA 試劑盒 TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關(guān)因子2抗原 0.5ml

IL-4： 白介素4抗體 兔腎細胞;RK-13

PC-12細胞，大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化) HCT 116(結(jié)腸癌細胞) 人神經(jīng)母細胞瘤細胞;BE(2)-M17 人DNA結(jié)合蛋白(DBP)ELISA 試劑盒 TRAF3/CD40bp (CD40 binding protein) 壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗原 0.5mg