回收儀器設(shè)備二手氨基酸分析儀
【簡(jiǎn)單介紹】
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【詳細(xì)說(shuō)明】
回收儀器設(shè)備二手氨基酸分析儀 氨基酸分析儀,是指用于測(cè)定蛋白質(zhì)、肽及其他藥物制劑的氨基酸組成或含量的方法。進(jìn)行氨基酸分析前,必須將蛋白質(zhì)及肽水解成單個(gè)氨基酸。它是基于陽(yáng)離子交換柱分離、柱后茚三酮衍生、光度法測(cè)定的離子交換色譜儀。氨基酸分析儀由色譜柱、自動(dòng)進(jìn)樣器、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)記錄和處理系統(tǒng)組成。氨
氨基酸分析儀的基本原理為流動(dòng)相(緩沖溶液)推動(dòng)氨基酸混合物流經(jīng)裝有陽(yáng)離子交換樹(shù)脂的色譜柱,各氨基酸與樹(shù)脂中的交換基團(tuán)進(jìn)行離子交換,當(dāng)用不同的pH緩沖溶液進(jìn)行洗脫時(shí)因交換能力的不同而將氨基酸混合物分離,分離出的單個(gè)氨基酸組分與茚三酮試劑反應(yīng),生成紫色化合物或黃色化合物,用可見(jiàn)光檢測(cè)器檢測(cè)其在570nm、440rnn的吸光度。這些有色產(chǎn)物對(duì)應(yīng)的吸收強(qiáng)度與洗脫出來(lái)的各氨基酸濃度之間的關(guān)系符合朗伯-比爾定律。據(jù)此,可對(duì)氨基酸各組分進(jìn)行定性、定量分析。氨基酸分析儀也可利用陰離子交換分離后經(jīng)積分脈沖安培法檢測(cè),該檢測(cè)方法無(wú)需將待測(cè)氨基酸進(jìn)行柱前或柱后衍生
儀器基本結(jié)構(gòu)同普通HPLC相似,但針對(duì)氨基酸分析進(jìn)行了細(xì)節(jié)優(yōu)化(例如氮?dú)獗Wo(hù)、惰性管路、在線(xiàn)脫氣、洗脫梯度及柱溫梯度控制等等)
系統(tǒng)
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通常細(xì)分為兩種系統(tǒng):蛋白水解分析系統(tǒng)(鈉鹽系統(tǒng))和游離氨基酸分析系統(tǒng)(鋰鹽系統(tǒng)),利用不同濃度和pH值的檸檬酸鈉或檸檬酸鋰進(jìn)行梯度洗脫。其中鈉鹽系統(tǒng)一次多分析約25種氨基酸,速度較快,基線(xiàn)平直度好;鋰鹽系統(tǒng)一次多分析約50種氨基酸,速度較慢,基線(xiàn)一般不如鈉鹽系統(tǒng)好。
效果
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分析效果:從目前已知的氨基酸分析方法比較來(lái)看,除靈敏度(低檢測(cè)限)比HPLC柱前衍生方法稍低以外(HPLC:<0.5pmol;氨基酸分析儀:<10pmol),其他如分離度、重現(xiàn)性、操作簡(jiǎn)便性、運(yùn)行成本等方面,都優(yōu)于其他分析方法。
辨別
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1、原理?;陉?yáng)離子交換柱分離、柱后茚三酮衍生、光度法測(cè)定的離子交換色譜法(IEC)。此類(lèi)方法由Stein和Moore兩人1958年發(fā)明,并于1972年獲諾貝爾獎(jiǎng),是當(dāng)今標(biāo)準(zhǔn)和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)以及仲裁和涉外的方法。
2、重要指標(biāo)。滿(mǎn)足分析需要的技術(shù)指標(biāo)如分離度、重復(fù)性等要求,而其中的分離度又是更為重要的指標(biāo),因?yàn)?,色譜理論一般以分離度達(dá)到1.2作為兩峰基本分離的判定前提,只有峰分開(kāi)了,才有意義去討論定性和定量的重復(fù)性。
3、指標(biāo)的真實(shí)性。有些廠(chǎng)家只標(biāo)出個(gè)別氨基酸的指標(biāo)如Asp或Arg,或只用平均數(shù)據(jù)替代全部數(shù)據(jù)等等,而儀器性能好,經(jīng)營(yíng)信譽(yù)較高的廠(chǎng)家就會(huì)標(biāo)出全部氨基酸的指標(biāo)供用戶(hù)參考。
回收儀器設(shè)備二手氨基酸分析儀
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