南京信帆生物技術(shù)有限公司
中級會員 | 第10年

18001994881

如何操作甲狀腺球蛋白放免試劑盒?

時間:2017/10/20閱讀:2875
分享:

甲狀腺球蛋白放免試劑盒基本信息簡介

甲狀腺球蛋白是甲狀腺濾泡上皮分泌的660 ku糖蛋白,每個Tg約有2個甲狀腺素(T4)和0.5個三碘甲腺原氨酸(T3)分子,儲存在濾泡腔中。溶酶體水解Tg表面T4T3并使之釋放入血,同時少量的Tg也釋放入血,部分Tg經(jīng)甲狀腺淋巴管分泌入血。血循環(huán)中的Tg被肝臟的巨噬細(xì)胞清除。甲狀腺球蛋白(Thyroglobulin,Tg),是甲狀腺濾泡上皮分泌的660 ku糖蛋白,每個Tg約有2個甲狀腺素(T4)0.5個三碘甲腺原氨酸(T3)分子,儲存在濾泡腔中。溶酶體水解Tg表面T4、T3并使之釋放入血,同時少量的Tg也釋放入血,部分Tg經(jīng)甲狀腺淋巴管分泌入血。血循環(huán)中的Tg被肝臟的巨噬細(xì)胞清除。分泌因素,刺激Tg的分泌因素包括促甲狀腺素(TSH)和胰島素樣生長因子-1(IGF-1);抑制因子是γ-干擾素、α-腫瘤壞死因子和維甲酸。Tg的分泌率為100 mg/(60。

甲狀腺球蛋白放免試劑盒如何操作 

實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。

為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37,60分鐘。

3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

4.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。

5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。

    購買本公司的放免試劑盒,享受零運(yùn)費(fèi)運(yùn)輸,售后完善。另外還可以享受酶聯(lián)免疫技術(shù)服務(wù),技術(shù)熟練的操作人員, 加上精密的實(shí)驗(yàn)儀器,確保每一份實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可靠。本司所售的試劑盒,*!售前售中售后全程提供技術(shù) 指導(dǎo),有質(zhì)量問題,可免費(fèi)退換!

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言