凍干粉標準菌株正確復溶方法

凍干粉標準菌株正確復溶方法
 

【冷凍管開封】 用浸過 75%酒精的脫脂棉嚴格消毒冷凍管蓋。

【菌株復溶】無菌環(huán)境中旋開裝有復溶液的滴瓶蓋，吸取 1ml 左右復溶液，加入到冷凍管中。輕輕振蕩，使凍干菌 株溶解呈懸浮狀。

【菌株復壯】用無菌吸管吸取菌懸液，轉(zhuǎn)移到復溶液滴瓶中。做好標識，在適宜溫度下培養(yǎng)。細菌在 30-35℃培養(yǎng) 箱中培養(yǎng) 24-48h，真菌在 20-25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24-72h（必要時，可適當延長培養(yǎng)時間）。

【菌株傳代】將得到的菌株的新鮮培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到適宜的固體培養(yǎng)基及液體培養(yǎng)基中（盡量增大接種量：如用無菌吸 管吸取≥50μl 新鮮培養(yǎng)物至固體培養(yǎng)基，邊移動邊緩慢釋放），適宜溫度下培養(yǎng)，用以菌株的保藏、傳 代及制備工作菌株。

【注意事項】

1、 菌種活化前，將冷凍管保存在低溫、清潔、干燥的環(huán)境中，長時間室溫下放置會導致菌種衰退；

2、 冷凍管開封、凍干粉復溶、菌株恢復培養(yǎng)等操作應在無菌條件下進行；

3、 一些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后，延遲期較長，部分需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長；

4、 苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)需采用含特定營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，敬請正確選擇，不清楚時來電詢問；

5、 某些厭氧菌的培養(yǎng)，自開封到接種完成，均需以無氧氣體充填，以保持厭氧狀態(tài)；培養(yǎng)過程中亦要保 持厭氧狀態(tài)；

6、 某些菌種，如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需要 5-10%CO2促進生長；

7、 如發(fā)現(xiàn)冷凍管蓋松動、復溶液渾濁等異常情況，應停止使用對應產(chǎn)品。

8、 部分菌種有致病性、擴散性，請專業(yè)人員在專業(yè)環(huán)境下有保護性操作。