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中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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Factor Xa 蛋白酶使用建議

時(shí)間:2023/7/11閱讀:1084
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Factor Xa 蛋白酶使用建議

本產(chǎn)品是從牛血漿純化得到,并經(jīng)RusseII蛇毒中的活化酶活化處理后的Factor Xa蛋白酶。Factor Xa蛋白酶的常見(jiàn)切割位點(diǎn)位于Ile-Glu/Asp-Gly-Arg序列中的精氨酸殘基之后。由于蛋白質(zhì)底物構(gòu)象的變化,F(xiàn)actor Xa蛋白酶也可能于其它堿性氨基酸殘基處發(fā)生切割。在這些已經(jīng)測(cè)序的氨基酸殘基中,最常見(jiàn)的次級(jí)識(shí)別位點(diǎn)是Gly-Arg序列。

保存條件

-20℃。

活性定義

50μl反應(yīng)體系中,20mM Tris-HCl,100mM NaCl, 2mM CaCl2 (pH 8.0儲(chǔ)存于25℃),50μg MBP融合蛋白測(cè)試底物。在6小時(shí)或更短時(shí)間內(nèi),1μg的Factor Xa能夠完-全切割95%的50μg測(cè)試底物。

使用建議

建議酶切反應(yīng)時(shí)的底物濃度為0.1-20mg/ml,酶:底物為1:10-1:200 (w/w),溫度范圍為0-37℃,pH 7-10,在1-20 小時(shí)內(nèi)完成酶切反應(yīng)。

注意:上述反應(yīng)條件只是一般建議,不一定適合所有的蛋白,建議客戶針對(duì)不同的蛋白提前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定最佳反應(yīng)條件。

注意事項(xiàng)

1)-20℃條件下,于20mM HEPES(pH 8.0儲(chǔ)存于4℃),500mM NaCl,2mM CaCl2,50%甘油中保存。

2)建議客戶針對(duì)不同的蛋白提前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定最佳反應(yīng)條件。

僅供科研或生產(chǎn)使用,不可直接應(yīng)用于人體。

 

 

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