谷氨酸（Glu）含量測定試劑盒說明書

測定原理：
利用提取液提取，然后用顯色劑進行顯色，顯色后在570nm 下進行測定。

需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰、
蒸餾水。

試劑的組成和配制：
試劑一：液體120mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 瓶， 4℃保存；臨用前加入5mL 蒸餾水充分溶解混勻，用不完的試劑仍 4℃
保存。

谷氨酸提?。?br />1、細菌或培養(yǎng)細胞樣品：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞
數(shù)量（104 個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議500 萬細菌或細胞加入1mL
試劑一），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30
次）；8000g 常溫離心10min，取上清，置冰上待測。
2、組織樣品：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組
織，加入1mL 試劑一），進行冰浴勻漿。8000g 常溫離心10min，取上清，置冰上待測。
3、血清（漿）或細胞培養(yǎng)液樣品：按照血清（漿）或細胞培養(yǎng)液體積（mL）：試劑一體積
(mL)為1：5~10 的比例（建議取0.1mL 血清（漿）或者細胞培養(yǎng)液加入1mL 試劑一），進
行冰浴勻漿。8000g 常溫離心10min，取上清，置冰上待測。

測定步驟
1、 分光光度計或酶標儀預熱30min 以上，調節(jié)波長至570nm，蒸餾水調零。
2、 在有蓋EP 管中加入下列試劑：
試劑名稱（μL） 測定管 對照管
樣本 250
試劑一 250
試劑二 50 50
混勻，90℃水浴20min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻，取200uL 至微量石英比色皿
或96 孔板中，于570nm 波長處記錄吸光值A?！鰽=A 測定管-A 對照管。對照管只要做一
管。