解析質粒提取原理及常見問題

質粒是真核細胞細胞核外或原核生物擬核區(qū)外能夠進行自主復制的遺傳單位，包括真核生物的細胞器（主要指線粒體和葉綠體）中和細菌

細胞擬核區(qū)以外的環(huán)狀脫氧核糖核酸分子。現在習慣上用來專指細菌(大腸桿菌）、酵母菌和放線菌等生物中細胞核或擬核中的 DNA 以外的DNA 分子。在基因工程中質粒常被用做基因的載體。質粒上常有抗生素的抗性基因，例如，四環(huán)素抗性基因或卡那霉素抗性基因等。有些質粒稱為附加體(episome)，這類質粒能夠整合進細菌的染色體，也能從整合位置上切離下來成為游離于染色體外的 DNA 分子。質粒在宿主細胞體內外都可復制。(Vector)(DNA)

目前，已發(fā)現有質粒的細菌有幾百種，已知的絕大多數的細菌質粒都是共價閉合環(huán)狀 DNA 分子(簡稱 cccDNA)。細菌質粒的相對分子質量一般較小，約為細菌染色體的 0.5%～3%。根據相對分子質量的大小，大致上可以把質粒分成大小兩類：較大一類的相對分子質量是 40×10⁶ 以上，較小一類的相對分子質量是 10×10⁶ 以下(少數質粒的相對分子質量介于兩者之間)。每個細胞中的質粒數主要決定于質粒本身的復制特性。按照復制性質，可以把質粒分為兩類：一類是嚴緊型質粒，當細胞染色體復制一次時，質粒也復制一次，每個細胞內只有1～2個質粒；另一類是松弛型質粒，當染色體復制停止后仍然能繼續(xù)復制，每一個細胞內一般有 20 個左右質粒。這些質粒的復制是在寄主細胞的松弛控制之下的，每個細胞中含有 10-200 份拷貝，如果用一定的藥物處理抑制寄主蛋白質的合成還會使質?？截悢翟鲋翈浊Х?。