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探針?lè)ńY(jié)膜支原體實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Conjunctivae

貨號(hào)：Mqt-con-20      規(guī)格：20個(gè)反應(yīng)

貨號(hào)：Mqt-con-50      規(guī)格：50個(gè)反應(yīng)

貨號(hào)：Mqt-con-100     規(guī)格：100個(gè)反應(yīng)

儲(chǔ)存：-20度，避光保存，保質(zhì)期一年。避免反復(fù)凍融。

試劑盒特點(diǎn)：

1，可以特異性檢測(cè)結(jié)膜支原體，與其他生物無(wú)交叉反應(yīng)。

2，靈敏度高，檢測(cè)極限為反應(yīng)液中4個(gè)基因組。

3，使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力強(qiáng)和熱穩(wěn)定性好的特點(diǎn)；采用熱啟動(dòng)方式，可抑制非特異性擴(kuò)增，降低背景熒光。

4，帶有陽(yáng)性對(duì)照樣品，可用于檢驗(yàn)試劑盒有效性。

5，帶有UDG酶和dUTP，可降低殘留DNA的污染。

結(jié)膜支原體（Mycoplasma Conjunctivae）是綿羊、山羊、羚羊等反芻動(dòng)物的傳染性角膜結(jié)膜炎（IKC）的主要病原體，在全球廣泛分布于家養(yǎng)的反芻類(lèi)動(dòng)物中。IKC是一種常見(jiàn)的傳染性眼病，稱(chēng)為小反芻動(dòng)物的紅眼病，可在家養(yǎng)和野生動(dòng)物之間傳播，其特點(diǎn)是結(jié)膜和角膜的炎癥。在晚期階段，角膜變得不透明甚至穿孔，致盲的野生動(dòng)物可能從懸崖墜落或死于饑餓。一項(xiàng)研究表明，成年綿羊中結(jié)膜支原體抗體的陽(yáng)性率為53％。支原體性IKC可以在不同物種之間傳播，傳播途徑可能是物理接觸或蒼蠅等媒介昆蟲(chóng)。目前在大多數(shù)國(guó)家尚不清楚結(jié)膜支原體的流行程度，這可能是由于缺乏檢測(cè)結(jié)膜支原體的技術(shù)。

結(jié)膜支原體感染的經(jīng)典診斷方法是體外培養(yǎng)和后續(xù)對(duì)支原體菌落的免疫學(xué)鑒定。但是這個(gè)方法非常繁瑣，需要較長(zhǎng)的時(shí)間，且需要專(zhuān)業(yè)化的技術(shù)。而使用PCR法檢測(cè)則具有高靈敏度和高特異性的特點(diǎn)，且檢測(cè)時(shí)間短，僅需幾個(gè)小時(shí)即可獲得結(jié)果。定量PCR法與普通PCR法相比，不僅可以進(jìn)行定量分析，而且操作更為方便，更少受環(huán)境污染的影響。

本試劑盒選取了結(jié)膜支原體基因組內(nèi)的一個(gè)膜蛋白基因進(jìn)行PCR鑒定，引物經(jīng)BLAST驗(yàn)證為特異性靶向結(jié)膜支原體，與其他生物的基因組無(wú)交叉反應(yīng)。通過(guò)檢測(cè)親緣關(guān)系較近的支原體和寄生于羊的其他微生物，本試劑盒對(duì)結(jié)膜支原體具有特異性，未見(jiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。對(duì)來(lái)自182只山羊、綿羊或羚羊的拭子樣本進(jìn)行檢測(cè)，本試劑盒檢測(cè)靈敏度明顯優(yōu)于平行檢測(cè)的巢式PCR法。

本試劑盒包含熱啟動(dòng)DNA聚合酶、dNTP（以dUTP代替dTTP）、引物、探針、陽(yáng)性對(duì)照品、ROX染料，和用以防止殘余DNA污染的UDG（Uracil-?DNA?Glycosylase，尿嘧啶-DNA-糖基酶），用戶(hù)只需準(zhǔn)備好DNA樣品即可使用。

本試劑盒采用的DNA聚合酶源自極-端嗜熱菌（Thermus thermophilus），經(jīng)改造后較普通的Taq酶具有更強(qiáng)的抗抑制能力和熱穩(wěn)定性。通過(guò)結(jié)合特異性單克隆抗體，在室溫下DNA聚合酶活性被抑制。在PCR循環(huán)的熱變性階段，抗體受熱被去除，此時(shí)DNA聚合酶活性恢復(fù)，因此獲得“熱啟動(dòng)"功能。熱啟動(dòng)可減少殘余DNA的污染，提高PCR擴(kuò)增效率、靈敏度和目的片段產(chǎn)量。

本產(chǎn)品僅供研究使用。

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