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“相塌陷”來的是如此突然

閱讀:1526      發(fā)布時間:2021-12-27
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微信截圖_20211227133945.png

在疏水作用色譜也就是反相色譜中經(jīng)常能聽到的名詞,在實驗過程中的表現(xiàn)形式為,對物質(zhì)沒有保留,出峰時間靠前,使得峰之間沒有保留。


案例

色譜柱:Ultimate® XB-C8 21.2×250mm,10μm。

流動相:近似純水。

第一天 

正常活化進(jìn)樣色譜圖:


微信截圖_20211227134017.png

晚上不進(jìn)樣,由于流動相中沒有酸堿等添加劑,清洗自動進(jìn)樣器后關(guān)機。


第二天 

直接流動相沖洗2倍柱體積進(jìn)樣色譜圖:

(中間已經(jīng)進(jìn)樣過30多針)


微信截圖_20211227134204.png

一切正常,由于實現(xiàn)了色譜柱自由,樣品也足夠干凈,為了下周一過來能更快做實驗,仍然清洗自動進(jìn)樣器后關(guān)機


周一 

平衡2倍柱體積進(jìn)樣:


微信截圖_20211227134235.png

出峰異常沒有峰,懷疑色譜柱沒有平衡好,畢竟過了周末,沖多洗一段時間,出峰正常,但是出峰提前了2分鐘幾個雜質(zhì)峰均為分離。

微信截圖_20211227134305.png

排查原因:

1、流動相是否弄錯了;

2、儀器參數(shù)設(shè)置是否正常;

3、儀器實際流速是否正常。

均正常后,懷疑色譜柱相塌陷,雖然C8的極性較強,耐受高比例的水甚至純水,但是畢竟在近純水的環(huán)境中浸泡了48小時,80%乙腈水沖洗5倍柱體積,再進(jìn)樣正常。

微信截圖_20211227134332.png

知識點:反相色譜固定相。

例如:C18,C8,PHEYNL等耐受高比例的水甚至是純水,其實是指在這樣的流動相體系中不發(fā)生相塌陷,保留時間峰面積等都穩(wěn)定,不影響日常檢測。


在這個案例中,C8鍵合相在長時間浸泡在近純水的體系中仍然出現(xiàn)了相塌陷,因此,在較長時間不使用時還是需要用較高比例的有機溶劑水進(jìn)行沖洗保持。



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