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熒光酶標儀與光吸收酶標儀原理及區(qū)別

閱讀:886      發(fā)布時間:2019-1-4
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熒光酶標儀原理
  由光源氙弧燈發(fā)出的光通過切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后,此光即為熒光物質的激發(fā)光,被測的熒光物質在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光,經過單色器變成單色熒光后照射于測樣品用的光電倍增管上,由其所發(fā)生的光電流經過放大器放大輸至記錄儀,激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動機帶動的凸輪所控制,當測繪熒光發(fā)射光譜時,將激發(fā)光單色器的光柵,固定在*適當?shù)募ぐl(fā)光波長處,而讓熒光單色器凸輪轉動,將各波長的熒光強度訊號輸出至記錄儀上,所記錄的光譜即發(fā)射光譜。
  當測繪熒光激發(fā)光譜時,將熒光單色器的光柵固定在*適當?shù)臒晒獠ㄩL處,只讓激發(fā)光單色口的凸輪轉動,將各波長的激發(fā)光的強度訊號輸出至記錄儀,所記錄的光譜即激發(fā)。
  當進行樣品溶液的定量分析時,將激發(fā)光單色器固定在所選擇的激發(fā)光波長處,將熒光單色器調節(jié)至所選擇的熒光波長處,由記錄儀得出的信號是樣品溶液的熒光強度。
光吸收酶標儀原理
  光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光, 400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。光吸收酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物吸光值。 
  光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關系。
       在特定波長下測定每一種物質都有其特定的波長,在此波長下,此物質能夠吸收*多的光能量。如果選擇其它的波長段,就會造成檢測結果的不準確。因此,在測定檢測物時,我們選擇特定的波長進行檢測,稱為測量波長。
  但是每一種物質對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準確性。在參照波長下,檢測物光的吸收*小。酶標儀檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。

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