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技術(shù)文章

大鼠催乳素ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法

閱讀:222          發(fā)布時間:2019-3-7

大鼠催乳素ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠催乳素(PRL)水平。用純化的大鼠催乳素(PRL)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入催乳素(PRL),再與HRP標記的催乳素(PRL)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的催乳素(PRL)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠催乳素(PRL)濃度。

安全性:
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

大鼠催乳素ELISA試劑盒組成: 
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶          7 終止液 6ml×1瓶
2 酶標試劑 6ml×1瓶                         8 標準品(1600pg/ml) 0.5ml×1瓶
3 酶標包被板 12孔×8條                   9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶                     10 說明書 1份
5 顯色劑A液 6ml×1瓶                       11 封板膜 2張 
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶                      12 密封袋 1個

大鼠催乳素ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:
1、 血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存……如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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