ATCC細胞因子的溶解方法介紹

ATCC細胞因子中不含載體蛋白或其他添加劑，并且通常以zui少量的鹽來進行凍干處理，因此微量的細胞因子在凍干過程中會沉積于管內(nèi)，形成很薄或不可見的蛋白層。所以我們建議在收到產(chǎn)品后，務(wù)必在開蓋前先離心，使粘在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底（此時能否見到白色沉淀均屬正?，F(xiàn)象）。 
1．離心：高速離心20-30秒，或低速離心5分鐘。 
2．溶解：細胞因子用去離子水或其它緩沖液溶解至說明書要求的濃度 （一般為 0.1-1.0 mg/mL，如10ug的產(chǎn)品，需用10uL-100uL的去離子水或緩沖液溶解）。溶解時不可振蕩，避免因化學鍵的斷裂造成蛋白失活，可加入適當?shù)娜軇┹p搖并靜置一段時間，待ATCC細胞因子*溶解后使用。溶劑的選擇： 
（1）要求用去離子水溶解的產(chǎn)品，務(wù)必不可用鹽溶液，避免過高的鹽濃度造成蛋白不可逆的析出； 
（2）要求用鹽溶液溶解的產(chǎn)品，請依照細胞因子說明書上的濃度，同樣也是為了避免過高的鹽濃度。 
3．分裝和貯存：ATCC細胞因子蛋白溶解后可根據(jù)自己的實驗需要進一步稀釋成工作液，稀釋可用RPMI 1640、DMEM或PBS等溶液，其中含有5-10%的FCS （小牛或胎牛血清）或0.5 %的BSA（牛血清白蛋白）來穩(wěn)定蛋白。工作液在4℃可保存1周，如需長期保存，則需分裝凍存于-20℃ （注意：不可凍存于-80℃）。分裝時每管中工作液的體積是一次實驗的用量，以實現(xiàn)每次實驗用完一只工作液，避免反復(fù)凍融引起蛋白活性的降低。