腫瘤耐藥細(xì)胞株的生長情況

*、腫瘤耐藥細(xì)胞株的生長情況
胚胎干細(xì)胞性很高，可以分化成各種細(xì)胞，細(xì)胞株能夠傳到40-50代，但遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變。而細(xì)胞系是細(xì)胞傳至50代以后生存下來，細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，并且?guī)в邪┳兊奶攸c。有可能在培養(yǎng)條件下無限增殖。安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后，在倒置鏡下觀察整個細(xì)胞生長情況。
1.如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
2.如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
 
第二、腫瘤耐藥細(xì)胞株的具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS洗1-2次。
2. 加1ml消化液于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若干細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
 
第三、腫瘤耐藥細(xì)胞株的注意事項：
1.觀察細(xì)胞在低倍鏡下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。
2.瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3.有些干細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。