ATCC細(xì)胞原蟲污染原因

培養(yǎng)液可輕微渾濁，在顯微鏡下細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動，ATCC細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會與細(xì)胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞占優(yōu)勢所以不會影響到細(xì)胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時就會影響到細(xì)胞的生長，zui終形成惡性循環(huán)。

ATCC細(xì)胞污染的可能原因：配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等。

關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中（不加細(xì)胞），37 度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長 就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗（硫酸鏈霉素和氨芐青霉素）。但雙抗有時會影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

ATCC細(xì)胞實(shí)驗(yàn)前，超凈臺/實(shí)驗(yàn)間紫外照射30min，細(xì)胞培養(yǎng)室有24h的空氣消毒裝置更好了。操作前70％酒精擦超凈臺消毒，酒精擦手，擦培養(yǎng)瓶，擦培養(yǎng)基瓶以及各種瓶子的口，總之，所有進(jìn)超凈臺的物品都用酒精擦拭一遍。拿培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)液時候盡量托下面拿，切忌不要拿瓶頸部位。有一點(diǎn)要注意的是，超凈臺里面的東西一定要盡量少放，東西太多活影響超凈臺內(nèi)空氣流通及空氣除菌。實(shí)驗(yàn)過程中盡量避免打鬧說笑。