ATCC細(xì)胞支原體污染的熒光檢測(cè)方法

ATCC細(xì)胞利用螢光染劑(bisbenzimide, Hoechst 33258)偵測(cè)支原體污染。此染劑會(huì)結(jié)合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich區(qū)域，因?yàn)橹гw之DNA中A-T含量占多數(shù)(55～80%)，所以可將其染色而偵測(cè)。被支原體污染之細(xì)胞經(jīng)染色后，在細(xì)胞核外與細(xì)胞周圍可看到許多大小均一之螢光小點(diǎn)，即為支原體之DNA，證明有支原體之污染。

測(cè)試步驟用間接步驟，將待測(cè)細(xì)胞懸浮液或細(xì)胞培養(yǎng)液接種于指示細(xì)胞培養(yǎng)液中(indicator cell，例如Vero cell or 3T6 cell)，然后培養(yǎng)指示細(xì)胞再作螢光染色。正負(fù)反應(yīng)對(duì)照組亦可以接種于indicator cell內(nèi)作為對(duì)照。

待測(cè)細(xì)胞亦可作直接測(cè)試，但需為吸附型ATCC細(xì)胞，培養(yǎng)后直接作螢光染色。有些細(xì)胞易有螢光背景，而干擾結(jié)果判讀，則建議使用接種于指示細(xì)胞之步驟。

特點(diǎn)：簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)與靈敏，廣泛使用，可作為例行之偵測(cè)步驟?？梢詡蓽y(cè)不易培養(yǎng)之支原體，例如M. hyorhinis，較直接培養(yǎng)法快，約一星期即可知道結(jié)果。

缺點(diǎn)：有時(shí)仍會(huì)有螢光背景，影響判讀。
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:    (S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-苯基丁酸    BOC-L-Homophenylalanine    含量:    BR，98%
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:    (R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-4-苯基丁酸    BOC-D-Homophenylalanine    含量:    BR，98%
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:    甘氨酸單鈉鹽    Sodium Glycinate    含量:    BR，98%
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:    L-(+)-羥甲基吡咯烷    L-Prolinol    含量:    BR，98%
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:    N-(氨基亞氨基甲基)-N-甲基甘氨酸    Creatine    含量:    BR，98%
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:    L-2-乙酰氨基-3-甲基丁酸    N-Acetyl-L-Valine    含量:    BR，98%
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:    N-乙?；?DL-色氨酸    N-Acetyl-DL-tryp tophane    含量:    BR，98.5%
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)    英文名稱:    N-乙酰氨基乙酸    N-Acetyl-glycine    含量:    BR，99%
ATCC細(xì)胞