干細(xì)胞鑒定法之成骨誘導(dǎo)分化

干細(xì)胞鑒定法之成骨誘導(dǎo)分化
茜素紅染色方法和原理：茜素紅又名茜素磺酸鈉，茜素S，茜素紅S，茜素胭脂紅，1,2-二羥基蒽醌-3-磺酸鈉，1,2-二羥基蒽醌-3-磺酸鈉鹽。橙黃色或黃棕色粉末。易溶于水，微溶于乙醇，不溶于苯。1%水溶液pH 為2.15，其水溶液呈淺黃褐色，加鹽酸后變成黃色，加氫氧化鈉后則變成藍(lán)紫色。有刺激性。能與許多金屬離子生成帶色化合物，能與鋯、釷、鋁、鈦及鈹和鈣的顯色反應(yīng)。染色的原理就是茜素紅和鈣發(fā)生顯色反應(yīng)，產(chǎn)生一種深紅色的帶色化合物，這樣成骨誘導(dǎo)的細(xì)胞外面沉積的鈣結(jié)節(jié)也就被染成了深紅色。

成骨誘導(dǎo)的過程是使鈣離子能夠以鈣鹽的方式沉淀下來，這就是我們常說的“鈣結(jié)節(jié)”。鑒定鈣結(jié)節(jié)的染色方法常用“茜素紅”。

步驟：
（1）吸去誘導(dǎo)液，再PBS 洗一到兩次；
（2）加入10％中性甲醛，固定30min-60min；
（3）吸去固定液，加入0.1%的茜素紅染色液，染色6-10min；
（4）用PBS 洗兩次，去處殘留的染色液；
（5）干細(xì)胞加入PBS，完成染色。
500G    十八水硫酸鋁        ALUMINUM SULFATE OCTADECAHYDRATE        KIT        7411-49-6
4L    鞘液,無防腐劑,8X        SHEATH SOLUTION, PRESERV-FREE, 8X        64285-73-0
4L    鞘液,含防腐劑,8X        SHEATH SOLUTION WITH PRESERV, 8X        
5kg                               尿素        UREA        
100 KG    磷酸鈉        SODIUM PHOSPHATE MONO DIHYDRAT        64285-73-0
12KG    磷酸鈉        SODIUM PHOSPHATE MONO DIHYDRAT        533-67-5
干細(xì)胞