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詳細(xì)介紹
人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞；HEH2價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞；HEH2價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一男性胎兒的心臟組織，2009年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%FBS
傳代方法 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
RNA DEPC ( 焦碳酸二乙酯 ) 10mL
RNA DTT ( 二硫代蘇糖 ) 10g
RNA EDTA·2Na ( 乙二胺四乙酸二鈉 ) 100g
RNA Guanidium HCl ( 鹽酸胍 ) 100g
RNA GuSCN( 異硫氰酸胍 ) 100g
RNA Oligo(dT) 纖維素 25mg
RNA PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30) 100g
RNA Sarkosyl( 月桂酰 -N- 甲基氨基乙酸鈉 ) 100g
RNA SDS( 十二烷基硫酸鈉 ) 100g
RNA Tris Base( 三羥甲基氨基甲烷 ) 100g
RNA 溶解液 10mL
RNA 洗脫液 10mL
RNA 洗脫液 50mL
RNA 長(zhǎng)效保存液 1.5mL
RNAi，RNA 干擾載體及基因片段等系列 2 μg
RNase A 干粉 100mg5-Chloro-N-[4-（cyclohexylureidosulfonyl）phenethyl]-2-methoxybenzamide； Glyburide， N-p-[2-（5-Chloro-2-methoxybenzamido）ethyl]benzenesulfonyl-N’-cyclohexylureaGlibenclamide
N-（4-（（6，7-Dimethoxyquinolin-4-yl）oxy）phenyl）-N-（4-fluorophenyl）cyclopropane-1，1-dicarboxamideCarbozantinib
POE （20） sorbitan monooleate， Polyethylene glycol sorbitan monooleate， Polyoxyethylenesorbitan monooleate， Polysorbate 80Tween 80， MegaPure Detergent， 10% Solution
2-[（1，2-Dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidene）methyl]-4-meth yl-1H-pyrrole-3-propanoic acidSU-5402
2-（2-propylpyridin-4-yl）-4-（p-tolyl）thiazoleFatostatin
N-（4-Chloro-3-trifluoromethyl-phenyl）-2-ethoxy-6-pentadecyl-benzamideHAT Activator， CTPB
2-Amino-9-[（2R，3R，4S，5R）-3，4-dihydroxy-5-（hydroxymethyl）-2-tetrahydrofuranyl]-3，7-dihydropurine-6，8-dione； 8-Oxoguanosine8-Hydroxyguanosine
（2E）-1-（6，7-Dimethoxy-3，4-dihydro-1H-isoquinolin-2-yl）-3-（1-methyl-2-phenyl-1H-pyrrolo[2，3-b]pyridin-3-yl）-propenone hydrochlorideSmad3 Inhibitor， SIS3
（2S，3S，4S）-Carboxy-4-（1-methylethenKainic acid
Sulfo-SANPAH； Sulfo SANPAH； N-Sulfosuccinimidyl-6-（4’-azido-2’nitrophenylamino） hexanoate； nitrophenyl azide sulfo NHS ester； Sulfo-NHS-6-（4’-azido-2’nitrophenylamino）- hexanoateSulfo-SANPAH
2-Pyrimidinamine， N-[4-（4-ami-piperidinyl）-2-methoxyphenyl]-5-chloro-4-（1H-indol-3-ylAZD-3463
Mambalgin-1Mambalgin-1
N-[（3-hydroxyphenyl）methyl]-N’-[4-（4-pyridinyl）-2-thiazolyl ureaRKI-1447
3，4’，5，7-Tetrahydroxyflavone， 3，5，7-Trihydroxy-2-（4-hydroxyphenyl）-4H-1-benzopyran-4-one， RobigeninKaempferol
RNase A 干粉 500mg
RNase A 溶液，10mg/mL 1.5mL
RNase A 溶液，2mg/mL 1.5mL
RNase 抑制劑 ( 人源 ) 2500U
RNase 抑制劑 ( 人源 ) 400U
RNase 抑制劑 ( 小鼠源 ) 3000U
RNase 抑制劑 ( 豬源 ) 500U
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