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人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7價(jià)格

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更新時(shí)間:2017-01-07 07:57:39瀏覽次數(shù):296

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7價(jià)格售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7價(jià)格操作步驟:

1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  母系人肺巨細(xì)胞癌PG,單細(xì)胞克隆法分離鑒定得到的低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;裸鼠體內(nèi)成瘤率100%,肺轉(zhuǎn)移率44%,淋巴轉(zhuǎn)移率50%。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代;2~3天1次。
傳代情況 P6
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR  Amelogenin:X;CSF1PO:12,13;D13S317:12;D16S539:13;D18S51:14;D19S433:13,15.2;D21S11:29;D2S1338:18;D3S1358:16,17;D5S818:11;D7S820:9;D8S1179:13,15;FGA:19;TH01:7;TPOX:11,12;vWA:18;
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

雪旺細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
IPTG 干粉2.5g
21-0450-5周細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
17-004-100010 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝 )1000 支
Protein A 瓊脂糖1mL
BL21-CodonPlus-RP 菌種1mL
NS-398(COX-2 抑制劑 )1mg
動(dòng)物線粒體純化試劑盒 ( 粗提 )15 次
23-0570-100Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉醇 )100μL
70901-50柱式真菌 DNAout50 次
RNase A 溶液,10mg/mL1.5mL
超雜交液 ( 芯片 )10mL
硫酸卡那霉素溶液 ,50mg/mL10mL
噻孢霉素溶液 ,100mg/mL1mL
131012-1螢火蟲熒光素1mL
80934D-10TE 緩沖液,PH8.510mL
Southern 細(xì)菌 (G+)DNAout10 次
dITP 溶液,2.5mM2mL
即用型 PCR 試劑盒 2.0 9 mL
C600 菌種1mL
130405-10克必隆 eTS 超敏 PCR 法 cDNA 合成試劑盒10 次
90212-50高載量 PCR 片段純化試劑盒50 次Difenoconazole環(huán)唑119446-68-3
Alantolactone土木香內(nèi)酯546-43-0
Disodium fumarate富馬酸17013-01-3
Clorpyrifos毒死蜱2921-88-2
Zinc acetate醋酸鋅557-34-6
DIOSMETIN香葉木素520-34-3
3,3',4',5,7-Pentahydroxyflavone槲皮素117-39-5
TRIS(4,6-DIMETHYL-3-SULFANATOPHENYL)PHOSPHINE TRISODIUM SALT HYDRATE三(2,4-二基基)磷化氫-5,5',5''-三磺酸三443150-11-6
D-(+)-SORBOSED-山梨糖3615-56-3
PERFLUORO-2-METHYLPENTANE2-三基-1,1,1,2,3,3,4,4,5,5,5-十一代烷355-04-4
n-Propyl ether丙111-43-3
P-TOLUALDEHYDE 2,4-DINITROPHENYLHYDRAZONE對(duì)-DNPH2571-00-8
VARIAMINE BLUE B凡拉明藍(lán)B3566-44-7
Hydroxypropyl acrylate丙酸羥丙酯25584-83-2
SODIUM HYDROGEN FUMARATE富馬酸氫5873-57-4
Organic carbon(TOC) in water總有機(jī)碳(TOC)標(biāo)準(zhǔn)溶液
Potassium hydride氫化鉀7693-26-7
Dicyclohexylchlorophosphine二環(huán)己基化膦16523-54-9
Chloromethyl ethyl ether基3188-13-4
LAURIC ACID SODIUM SALT月桂酸629-25-4
ophiopogonin B麥冬皂苷 B38971-41-4

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