詳細(xì)介紹
人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞;RD圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞;RD圖片
形態(tài)特性 紡錘形細(xì)胞和大的多核細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 目前顯示,這株細(xì)胞如果跟TE 671 (ATCC HTB-139)不一樣,至少也是它的親本。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:13;D16S539:10,11;D18S51:13,18;D19S433:11,14;D21S11:28,29;D2S1338:17,23;D3S1358:15,17;D5S818:11;D7S820:8,12;D8S1179:11,15;FGA:20,21;TH01:9.3;TPOX:9;vWA:18
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-EGFP·PI)50 次
23-0620-1PMA/TPA (PKC 激活劑 )1mg
Tuner(DE3)plysS 菌種1mL
miRNA 熒光定量檢測試劑盒25 次
重蒸酚250mL
CAS25322-68-3聚乙二醇 3350250g
17-016-96200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 盒裝 )96 支
大提柱式土壤 DNAout4次
脫氧膽酸5g
CAS9001-59-6丙酮酸激酶2mg
CAS85186-71-6崩潰酶500mg
120653C-5填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次
JC-11mg
過氧化氫測試盒50 T
18-0010-200ATP 檢測試劑盒200 次人胃細(xì)胞(未分化)英文名稱:HGC-27
XLT4瓊脂/木糖-賴氨酸-硫酸四癸鈉瓊脂/XTL4 Agar/XLT4 Agar食品中致病菌,特別是沙門氏菌分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
貂肺上細(xì)胞英文名稱:Mv 1 lu
梭菌培養(yǎng)基/Reinfored Medium For Clostridia用于梭菌檢查250克國產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞英文名稱:OP9
人肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
TEMED10ml國產(chǎn)
K562/慢性髓性白血病細(xì)胞株國產(chǎn)
1.5M Tris-Cl(pH8.8)500ml國產(chǎn)
甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基/Mannitol Ferment Medium腸道桿菌的鑒別,細(xì)菌甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
豬脫氧膽酸/豬去氧膽酸/異去氧膽酸/二羥基膽烷酸/Hyodeoxycholic acidBR,98%10/25/100克國產(chǎn)/進(jìn)口
SK-OV-3(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人高分化胃細(xì)胞英文名稱:NCI-N87
TF-1(人血液白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
K562全細(xì)胞裂解液100μg100μg
10%SDS溶液100ml國產(chǎn)
甘露醇發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
豬膽鹽/Bile salt from pigBR,65%25/1000克國產(chǎn)/進(jìn)口
SMMC-7721(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)
人高轉(zhuǎn)移肺細(xì)胞英文名稱:95-D
胃粘膜素100mg
動(dòng)物細(xì)胞裂解液 B50mL
Dam 甲基轉(zhuǎn)移酶500U
RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.0100mL
CAS121-57-3對氨基苯磺酸25g
質(zhì)粒 ( 載體 ) 系列產(chǎn)品2μg
Bouin 固定液250 mL
鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液,10mg/mL10mL