hFOB 1.19 (SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞) 返回列表頁

我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細胞株說明書信息，我們專業(yè)您的細胞系實驗，讓您實驗再無煩擾！產(chǎn)品僅用于科研

名稱    hFOB 1.19 (SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞) (STR鑒定正確)
別稱 hFOB1.19; hFOB

種屬 人類

年齡（性別） 胎兒

組織來源 骨；成骨細胞；以SV40巨細胞抗原轉(zhuǎn)染

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 多細胞形態(tài)

背景描述 hFOB 1.19細胞是在0.6mg/mL新霉素G418存在下，用溫度敏感的表達載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然流產(chǎn)的胎兒四肢組織建立的細胞系。在許可溫度33.5℃下細胞分裂很快，而在限制溫度39.5℃下細胞極少分裂或不分裂。hFOB 1.19細胞具有分化為表達造骨細胞表型的成熟造骨細胞的能力；hFOB 1.19細胞提供了一個同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng)，用于研究正常人造骨細胞的分化、造骨細胞生理和激素、生長因子和對造骨細胞的功能及分化有影響的細胞因子。

生物安全等級 2 [Cells contain SV40 viral sequences]

生長培養(yǎng)基 DMEM/F12＋0.3mg/ml G418＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：34℃

抗原表達情況 SV40 T antigen

基因表達情況 alkaline phosphatase

注意事項 該細胞培養(yǎng)難度較高；培養(yǎng)溫度為度：33.5℃-34℃；培養(yǎng)基中添加G418。

保藏機構(gòu) ATCC; CRL-11372
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。

使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
lambda(λ)DNA5μg  超快蛋白銀染試劑盒1000mL

lambda(λ)DNA5μg  超級雜交液 B（含甲酰胺）100mL

lambda(λ)DNA5μg  超級雜交液 A（不含甲酰胺）100mL

φX174RF Ⅰ DNA30μg  超級雜交液 (Oligo 探針 )10mL

φX174RF Ⅱ DNA30μg  超級雜交液 ( 原位雜交 )10mL
FITC標記的含錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族13抗體

FITC標記的二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶5抗體

FITC標記的二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶3抗體

FITC標記的芳香基硫酸酯酶K抗體

FITC標記的芳香基硫酸酯酶H抗體
hFOB 1.19 (SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞)大鼠丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)elisa檢測試劑盒

大鼠丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)elisa檢測試劑盒

大鼠丙二醛 （MDA）elisa檢測試劑盒

大鼠丙二醛(MDA)elisa分析檢測試劑盒

大鼠丙二醛(MDA)elisa檢測試劑盒
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。