人非甲基化寡核苷酸（NON）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

人非甲基化寡核苷酸(NON)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Human nonmethylated oligonucleotide,NON ELISA Kit      檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
人非甲基化寡核苷酸(NON)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
人非甲基化寡核苷酸(NON)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2． 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
6． 在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請(qǐng)勿冷凍，有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品，按照1：100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）
人非甲基化寡核苷酸(NON)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

CDK4  周期素依賴性激酶4抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-c-Jun(Thr249)  磷酸化原基因c-Jun抗體規(guī)格: 0.1ml

CK14/17/42/10  細(xì)胞角蛋白14抗體規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgM/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗人IgM規(guī)格: 0.5ml

Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈規(guī)格: 0.1ml

FASP1/C21orf45  MaFF相關(guān)蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-RAD51(Thr310)  磷酸化Rad51抗體規(guī)格: 0.1ml

TRAF6  瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體規(guī)格: 0.1ml

CD158e  NK細(xì)胞抑制性受體3DL1抗體規(guī)格: 0.2ml

BRD8  甲狀激素受體共激活蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Integrin alpha E2  整合素alpha E2 抗體規(guī)格: 0.1ml

CRMP1  二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml

PPAP2C  磷酸脂磷酸水解酶2抗體規(guī)格: 0.1ml

MYLK3  肌球蛋白輕鏈激酶3抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit anti-MG IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的兔抗爪沙鼠IgG規(guī)格: 0.1ml

Phospho-GCN2 (Thr899)  磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

PRMT4  組蛋白氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶CARM1抗體規(guī)格: 0.2ml

IRS-2  胰島素受體底物-2抗體規(guī)格: 0.2ml

UGCG/Ceramide glucosyltransferase  葡萄糖神經(jīng)酰胺合成酶抗體規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc  兔抗小鼠IgG-Fc規(guī)格: 1mg

GCDFP15  特異性囊病液體蛋白15抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-human sIgA/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記兔抗人IgA規(guī)格: 0.1ml

FADS1  脂肪酸去飽和酶1抗體規(guī)格: 0.2ml

CENPP  著絲粒蛋白P抗體規(guī)格: 0.2ml香菇 Lentinula edodes

22RV1(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

銅綠假單胞菌 Pseudomonas aeruginosa

苜蓿中華根瘤菌

R 1610(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

擬康氏木霉

人皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

真姬菇 Hypsizigus marmoreus

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

紫紅曲霉 Monascus purpureus

人宮頸細(xì)胞英文名稱：HeLa 229

SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢腺細(xì)胞系 Human

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

人非甲基化寡核苷酸(NON)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

T/G HA－VSMC(人血管平滑肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

意大利酵母 Saccharomyces italicus

木槿刺盤孢 Colletotrichum hibisci

金黃地鼠肋骨來(lái)源細(xì)胞英文名稱：GHR2

人星形膠質(zhì)細(xì)胞 Human