人上皮膜抗原（EMA）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

人上皮膜抗原(EMA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Human Epithelial membrane antigen,EMA ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換
人上皮膜抗原(EMA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人上皮膜抗原(EMA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。
2． 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
6． 在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）
人上皮膜抗原(EMA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

KDM5B/PLU1/Jarid1B  組蛋白去甲基化酶JARID1B抗體規(guī)格: 0.2ml

CDMP1/GDF5  軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

Menin/Men1  Menin抑蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Phospho-mTOR (Tyr144)  磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

PMP2  周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-TRIM25(Ser100)  磷酸化雌激素反應(yīng)指狀蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

SEPT14  細(xì)胞分化蛋白SEPT14抗體規(guī)格: 0.2ml

CLASP2  細(xì)胞連接相關(guān)蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

DBF4A  S期激酶活化蛋白DBF4A抗體規(guī)格: 0.2ml

Plzf  早幼粒細(xì)胞白病鋅指蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-IRS1(Ser332/336)  磷酸化胰島素受體底物-1抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-ITGB3(Tyr773)  磷酸化整合素β3抗體規(guī)格: 0.1ml

LATS1  瘤抑制基因LATS1抗體規(guī)格: 0.2ml

Leptin receptor(long)  瘦素受體抗體（）規(guī)格: 0.1ml

phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr317)  磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體規(guī)格: 0.1ml

MMP-9  基質(zhì)金屬蛋白酶9抗體規(guī)格: 0.1ml

ERCC1  DNA切除修復(fù)蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

JMY  連接介導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-PPM1A(Ser375)  磷酸化蛋白磷酸酶2C亞型α抗體規(guī)格: 0.1ml

Keratocan  細(xì)胞角膜蛋白多糖抗體規(guī)格: 0.2ml

TNFR2/TRAF2/CD120b  瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體規(guī)格: 0.1ml

CD158b2  NK細(xì)胞抑制性受體2DL3抗體規(guī)格: 0.2ml RBE, 人肝膽管細(xì)胞 Human

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

Ca Ski(人宮頸上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

爪哇根霉 Rhizopus javanicus

棒桿菌 Corynebacterium sp.

CSC, 小鼠心肌細(xì)胞

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

珊瑚色諾卡氏菌 Nocardia corallina

WB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

暫無 Penicillium amagasakiense

大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

zui小弧菌 Vibrio mimicus

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

MCF7/腺細(xì)胞株國產(chǎn)

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus

小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

無花果曲霉 Aspergillus ficuum

厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydospora

Hs68(人男性正常龜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人上皮膜抗原(EMA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

香菇 Lentinula edodes

人脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

球孢白僵菌 Beauveria bassiana